本文選題：腦膜炎奈瑟氏菌 + NspA基因　； 參考：《長(zhǎng)春理工大學(xué)》2011年碩士論文

【摘要】：腦膜炎奈瑟氏菌是流行性腦膜炎的病原菌,根據(jù)其莢膜多糖抗原不同可分為13個(gè)血清群,包括A, B, C, D, X, Y, Z,29E, W125, H, I, K,根據(jù)細(xì)菌外膜蛋白和多脂糖成分不同可再分為血清型與亞型。我國(guó)流行菌群以A群為主,其次為B群和C群。近年來B群致病率有上升的趨勢(shì)。1997年Matin等報(bào)道,腦膜炎球菌的外膜上存在一種低分子量的保守的表面蛋白命名為腦膜炎奈瑟菌表面蛋白NspA (Neisseria surface Protein), NspA能在菌體持續(xù)表達(dá),抗NspA單克隆抗體能保護(hù)小鼠免于致死量腦膜炎奈瑟氏菌的攻擊,用重組的NspA免疫小鼠能誘導(dǎo)免疫保護(hù),是最具有潛力的腦膜炎奈瑟氏菌疫苗的候選抗原,渴望用于制備成防治流腦的疫苗。 本文以NspA基因?yàn)槟康幕?參照Genbank中已有的序列和原核表達(dá)質(zhì)粒PMD18-T, pSIP-409的序列,按照其開放讀碼框架,設(shè)計(jì)引物,體外擴(kuò)增目的基因,并將目的基因插入到PMD18-T, pSIP-409,得到重組質(zhì)粒PMD18-T-NspA, pSIP-409-NspA.并對(duì)PMD18-T-NspA基因的序列進(jìn)行測(cè)定,進(jìn)一步將目的基因與pSIP-409-NspA載體連接轉(zhuǎn)入大腸桿菌表達(dá)目的基因,實(shí)現(xiàn)NspA重組蛋白在大腸桿菌中的高效表達(dá)。
[Abstract]:Neisseria meningitidis is the pathogen of epidemic meningitis. According to its capsule polysaccharide antigen, it can be divided into 13 serum groups. It includes A, B, C, D, X, Y, ZN29E, W125, H, I, K, and can be subdivided into serotype and subtype according to bacterial outer membrane protein and fatty sugar composition. Group A was the most prevalent group in China, followed by group B and group C. In recent years, the pathogenicity of group B has been increasing. In 1997, Matin et al reported that there was a low molecular weight conserved surface protein on the outer membrane of Neisseria meningitidis called Neisseria surface protein. Anti-NspA monoclonal antibody can protect mice from the lethal dose of Neisseria meningitidis. Immunizing mice with recombinant NspA can induce immune protection and is the most potential candidate antigen of Neisseria meningitidis vaccine. Desire to be used to prepare a vaccine for the prevention and treatment of meningitis. According to the sequence of prokaryotic expression plasmids PMD18-T, pSIP-409 in Genbank, primers were designed to amplify the target gene in vitro and inserted into PMD18-T, pSIP-409. the recombinant plasmids PMD18-T-NspAand pSIP-409-NspAwere obtained. The sequence of PMD18-T-NspA gene was sequenced. The target gene was further ligated with pSIP-409-NspA vector to express the target gene in E. coli, and the recombinant protein of NspA was highly expressed in Escherichia coli.
【學(xué)位授予單位】：長(zhǎng)春理工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號(hào)】：R378

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2033035