一種水溶性免疫佐劑應(yīng)用于小分子化合物單克隆抗體制備的效果評(píng)價(jià)(英文)
本文選題:水溶性免疫佐劑 + 單克隆抗體; 參考:《Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology)》2016年04期
【摘要】:目的:評(píng)價(jià)一種新型水溶性免疫佐劑在制備小分子化合物單克隆抗體(單抗)中的應(yīng)用效果。創(chuàng)新點(diǎn):采用一種新型水溶性免疫佐劑,快速制備了分別針對(duì)4種農(nóng)藥和1種海洋毒素的高親合力單抗,且其性能與以往采用弗氏佐劑獲得的相應(yīng)單抗非常接近。方法:本研究以4種農(nóng)藥和1種海洋毒素為目標(biāo)分析物,采用一種新型水溶性佐劑與小分子抗原相互混合,直接對(duì)Balb/c小鼠進(jìn)行小腿肌肉注射免疫。經(jīng)過(guò)2~3次免疫后進(jìn)行腹腔注射常規(guī)末次免疫,細(xì)胞融合后篩選出了相應(yīng)的雜交瘤細(xì)胞株,制備并鑒定了針對(duì)上述半抗原小分子的特異性單抗。結(jié)論:采用該水溶性免疫佐劑制備抗原注射溶液無(wú)需乳化過(guò)程,免疫操作簡(jiǎn)便,且對(duì)小鼠負(fù)面效應(yīng)較小;雖然該處理小鼠產(chǎn)生的抗血清效價(jià)并沒(méi)有像常規(guī)弗氏免疫佐劑帶來(lái)的效價(jià)值高,但細(xì)胞融合后篩選得到有效細(xì)胞株的概率尚可;獲得的針對(duì)目標(biāo)分析物的單抗在靈敏度和特異性等方面都接近于以往采用弗氏佐劑獲得的單抗。試驗(yàn)結(jié)果表明,該水溶性免疫佐劑適用于針對(duì)小分子化合物單抗的高效制備。
[Abstract]:Aim: to evaluate the application of a novel water-soluble immune adjuvant in the preparation of monoclonal antibodies (McAbs) against small molecular compounds. Innovation: a novel water-soluble immunoadjuvant was used to prepare high affinity McAbs for four pesticides and one marine toxin, respectively, and their properties were very similar to those obtained by Freund's adjuvant. Methods: in this study, four pesticides and one marine toxin were used as target analytes. Balb / c mice were immunized with a new water-soluble adjuvant and small molecular antigen directly by intramuscular injection. The hybridoma cell lines were screened after intraperitoneal injection of routine final immunization after 23 immunizations and the specific monoclonal antibodies against these hapten small molecules were prepared and identified. Conclusion: using the water-soluble immune adjuvant to prepare the antigen injection solution does not need emulsifying process, the immunological operation is simple, and the negative effect on mice is small. Although the titer of antiserum produced by this treatment was not as high as that of conventional Freund's immune adjuvant, the probability of cell fusion screening for effective cell line was still acceptable. The sensitivity and specificity of the McAbs obtained were similar to those obtained by Freund's adjuvant. The experimental results show that the water-soluble immune adjuvant is suitable for the preparation of monoclonal antibodies against small molecular compounds.
【作者單位】: Institute
【基金】:supported by the Special Fund for Agro-scientific Research in the Public Interest(No.201203094-3) the Scientific Research Fund of Zhejiang Provincial Education Department(No.Y201329970) the National Natural Science Foundation of China(No.31401768) the Experimental Technology Research Project of Zhejiang University(No.SZD201404),China
【分類號(hào)】:R392-33
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,本文編號(hào):2017753
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