本文選題：大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 + 吲哚胺��； 參考：《臨床心血管病雜志》2017年11期

【摘要】：目的:探討過表達(dá)吲哚胺2,3雙加氧酶(IDO)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)通過分泌外排體(exosome)抑制免疫排異反應(yīng)機(jī)制研究。方法:通過慢病毒載體GV308攜帶IDO轉(zhuǎn)染干細(xì)胞構(gòu)建過表達(dá)IDOBMSCs體系并加入基因開啟劑強(qiáng)力霉素(DOX)后采用SBI公司的ExoQuick-TC提取分泌的exosome。同時建立大鼠腹腔異位移植心臟模型,經(jīng)尾靜脈給予相應(yīng)細(xì)胞分泌的exosome,利用超聲心動圖檢測經(jīng)注射過表達(dá)IDOBMSCs exosome(過表達(dá)IDO-BMSCs exosome組,A組)、空載體-BMSCs exosome(空載體-BMSCs exosome組,B組)、BMSCs exosome(BMSCs exosome組,C組)48h后移植心臟心功能變化,將移植未處理組、給予嗎替麥考組作為對照。完成心臟彩超后取A組、B組、C組大鼠注射48h后的脾臟,采用流式細(xì)胞技術(shù)檢測其CD40、CD86、CD80、MHCII、CD274、CD45RA、CD45RA+CD45RB、Treg細(xì)胞的表達(dá)情況,將移植未處理組、給予嗎替麥考組及正常大鼠(正常組)脾臟細(xì)胞作為對照。進(jìn)一步采用TMT標(biāo)記定量蛋白質(zhì)組學(xué)分析A組有關(guān)調(diào)節(jié)免疫排異的蛋白。結(jié)果:A組的LVEF、FS較其他各組有提高;采用流式細(xì)胞技術(shù)證實(shí)其CD40、CD86、CD80、MHCII、CD45RA、CD45RA+CD45RB表達(dá)降低,而CD274、Treg細(xì)胞的表達(dá)增高。蛋白質(zhì)譜示:Four and a half LIM domains 1蛋白為調(diào)節(jié)免疫排異反應(yīng)的關(guān)鍵蛋白。結(jié)論:采用TMT標(biāo)記過表達(dá)IDO-BMSCs分泌exosome內(nèi)蛋白,Four and a half LIM domains 1蛋白為調(diào)節(jié)免疫排異反應(yīng)的關(guān)鍵蛋白。
[Abstract]:Aim: to investigate the mechanism of inhibition of immune rejection by secreting exosome of rat bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) overexpression of indoleamine 2nd3 dioxygenase (IDO). Methods: Lentivirus vector GV308 carrying IDO transfected stem cells was used to construct the system of expressing IDOBMSCs and adding doxycycline (DOX) to extract exosome-secreted by ExoQuick-TC of SBI Company. At the same time, an ectopic heart transplantation model was established in rats. Exosome secreted by the corresponding cells was given via caudal vein. Echocardiography was used to detect the cardiac function changes of IDO-BMSCs exosome-expressing IDO-BMSCs exosome group (group A) and empty vector -BMSCs exosome group (empty vector -BMSCs exosome group) BMSCs exosome group B group (BMSCs exosome group C group) 48 hours after transplantation. The untreated group was given Matimex as a control group. The spleen of rats in group A, B and C were injected 48 hours after echocardiography, and the expression of CD40, CD86, MHCII, CD274RA45RA45RA, CD45RBT, Treg cells were detected by flow cytometry, and the untreated group was transplanted into the untreated group, and the expression of CD40, CD86, MHCII, CD274and CD45RA-CD45RA, CD45RBT / Treg cells were detected by flow cytometry. The spleen cells of the Mutimex group and the normal rats (normal group) were given as control group. Furthermore, TMT labeled quantitative proteomics was used to analyze group A proteins involved in regulation of immune rejection. Results compared with other groups, the expression of CD40, CD86, MHCI, CD45RA, CD45RB and CD274Treg cells were decreased and CD274Treg cells were increased by flow cytometry. The protein profile showed that the 1: four and a half Lim domains 1 protein was the key protein to regulate immune rejection. Conclusion: the overexpression of exosome secreted by IDO-BMSCs with TMT-labeled expression of four and a half Lim domains 1 protein is the key protein to regulate immune rejection.
【作者單位】： 云南省第一人民醫(yī)院心臟大血管外科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(No:81460073,31460298) 云南省科技廳-昆明醫(yī)科大學(xué)應(yīng)用基礎(chǔ)研究聯(lián)合專項(xiàng)(No:2014FB089) 云南省教育廳科學(xué)研究基金(No:2015Z051) 中國博士后科學(xué)基金(No:2015M582764XB) 成都醫(yī)學(xué)院2015年度科研項(xiàng)目(No:CYZ15-18) 云南省醫(yī)學(xué)后備人才(No:H-201607)
【分類號】：R392

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本文編號：2002543