本文選題：單核細(xì)胞 + 未成熟樹突狀細(xì)胞　； 參考：《中國免疫學(xué)雜志》2017年07期

【摘要】：目的:以人外周血來源的單核細(xì)胞為前體細(xì)胞,建立體外快速分離和誘導(dǎo)培養(yǎng)未成熟樹突狀細(xì)胞(Immature dendritic cell,iDC)的方法。方法:采用Ficoll密度梯度離心方法和MACS磁珠分選系統(tǒng),收集高純度CD14~+單核細(xì)胞;用rhGM-CSF、rhIL-4聯(lián)合誘導(dǎo)培養(yǎng)CD14~+單核細(xì)胞,第4天獲得未成熟樹突狀細(xì)胞(iDC),應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞表面標(biāo)記(CCR5)和抗原吞噬能力,普通光學(xué)顯微鏡、掃描電鏡和透射電鏡觀察細(xì)胞表面和內(nèi)部結(jié)構(gòu)特征。結(jié)果:CD14免疫磁珠技術(shù)獲得CD14~+單核細(xì)胞純度達(dá)94%以上,誘導(dǎo)分化第4天的iDC具有CCR5特征性標(biāo)志和吞噬能力,普通光學(xué)顯微鏡及電鏡觀察到iDC出現(xiàn)樹突狀細(xì)胞典型特征。結(jié)論:體外快速誘導(dǎo)培養(yǎng)是獲得大量具有典型特征的iDC的有效方法,并可應(yīng)用于進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)研究。
[Abstract]:Objective: to establish a method for rapid isolation and induction of immature dendritic cells (Immature dendritic cell, iDC) in vitro from monocyte derived from human peripheral blood. Methods: Ficoll density gradient centrifugation and MACS magnetic bead sorting system were used to collect high purity CD14~+ mononuclear cells, and rhGM-CSF and rhIL-4 were used to induce culture of CD14~+ mononuclear cells. CD14~+ mononuclear cells were cultured and immature dendritic cells (iDC) were obtained at fourth days. Flow cytometry was used to detect cell surface markers (CCR5) and antigen phagocytosis. Common optical microscopy, scanning electron microscopy and transmission electron microscopy were used to observe the surface and internal structure characteristics of the cells. Results: the purity of CD14~+ mononuclear cells obtained by CD14 immunomagnetic beads was more than 94%, IDC with fourth days of induced differentiation has CCR5 characteristic signs and phagocytosis. The typical characteristics of dendritic cells in iDC are observed by ordinary optical microscopy and electron microscopy. Conclusion: rapid induction and culture in vitro is an effective method for obtaining a large number of typical features of iDC and can be applied to a further experimental study.
【作者單位】： 青島市中心醫(yī)院藥學(xué)部;青島市腫瘤醫(yī)院藥學(xué)部;軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院軍事獸醫(yī)研究所 省部共建吉林省人獸共患病預(yù)防與控制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;長春中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(31472197) 病原微生物生物安全國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室開放課題(SKLPBS1435) 北京市自然科學(xué)基金(5152023) 吉林省青年科研基金項(xiàng)目(20140520173JH)資助項(xiàng)目
【分類號(hào)】：R392

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1999032