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結(jié)核桿菌耐熱抗原對(duì)A549細(xì)胞分泌SP-B和凋亡的影響

發(fā)布時(shí)間:2018-06-07 02:51

  本文選題:結(jié)核桿菌耐熱抗原 + A細(xì)胞 ; 參考:《安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)》2017年09期


【摘要】:目的探討結(jié)核桿菌耐熱抗原(Mtb-HAg)刺激誘導(dǎo)人肺腺癌細(xì)胞系(A549)細(xì)胞后對(duì)其肺泡表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B(SP-B)的分泌和凋亡的影響。方法用不同濃度的Mtb-HAg分別刺激誘導(dǎo)A549細(xì)胞,相同條件分別培養(yǎng)24、48 h,同時(shí)設(shè)置空白對(duì)照組(對(duì)照組1和對(duì)照組2)和陽(yáng)性對(duì)照組[脂多糖(LPS)組和姜黃素組]。運(yùn)用ELISA法檢測(cè)對(duì)照組1、LPS組和實(shí)驗(yàn)組1(2、3μg/ml Mtb-HAg分別誘導(dǎo)A549細(xì)胞培養(yǎng)24 h和48 h)培養(yǎng)上清液中的SP-B表達(dá)量;使用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)對(duì)照組1、LPS組和實(shí)驗(yàn)組1中基因SFTPB的相對(duì)表達(dá)量;采用流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)對(duì)照組2、姜黃素組和實(shí)驗(yàn)組2(2、3μg/ml Mtb-HAg分別誘導(dǎo)A549細(xì)胞培養(yǎng)24 h)中A549細(xì)胞的凋亡率。結(jié)果刺激誘導(dǎo)相同時(shí)間,實(shí)驗(yàn)組1的SP-B表達(dá)量低于對(duì)照組1,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);相同濃度刺激誘導(dǎo)隨時(shí)間的延長(zhǎng),實(shí)驗(yàn)組1中SP-B表達(dá)量降低的不顯著。相同培養(yǎng)時(shí)間,隨著Mtb-HAg濃度的增加實(shí)驗(yàn)組1表達(dá)SP-B的基因SFTPB的相對(duì)表達(dá)量顯著低于對(duì)照組1,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);而在相同有效刺激濃度下,其相對(duì)表達(dá)量隨作用時(shí)間變化不顯著。姜黃素組和實(shí)驗(yàn)組2中的A549細(xì)胞凋亡率顯著高于對(duì)照組2(P0.05)。結(jié)論 Mtb-HAg對(duì)A549細(xì)胞表達(dá)SP-B的抑制作用明顯,并能誘導(dǎo)A549細(xì)胞發(fā)生凋亡。
[Abstract]:Objective to investigate the effects of Mtb-HAg on the secretion and apoptosis of human lung adenocarcinoma cell line (A549) induced by Mtb-HAg. Methods A549 cells were stimulated with different concentrations of Mtb-HAg and cultured for 24 h under the same conditions. The control group (control group 1 and control group 2) and the positive control group [lipopolysaccharide (LPS) group and curcumin group] were set up at the same time. ELISA assay was used to detect the expression of SP-B in the supernatant of A549 cells cultured for 24 h and 48 h, respectively, and the relative expression of gene SFTPB in control group 1 and experimental group 1 was detected by real-time fluorescence quantitative PCR. Flow cytometry was used to detect the apoptosis rate of A549 cells induced by 2 渭 g/ml Mtb-HAg of curcumin group and 2 渭 g/ml Mtb-HAg of curcumin group for 24 h. Results the expression of SP-B in experimental group 1 was lower than that in control group 1 at the same time, the difference was statistically significant (P 0.05), but the expression of SP-B in experimental group 1 was not significantly decreased with the prolongation of stimulation at the same concentration. At the same culture time, the relative expression of SP-B gene SFTPB in experimental group 1 was significantly lower than that in control group 1 with the increase of Mtb-HAg concentration, and the difference was statistically significant (P 0.05). The relative expression level did not change significantly with the time of action. The apoptosis rate of A549 cells in curcumin group and experimental group 2 was significantly higher than that in control group 2 (P 0.05). Conclusion Mtb-HAg can inhibit the expression of SP-B in A549 cells and induce the apoptosis of A549 cells.
【作者單位】: 安徽醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院免疫學(xué)教研室及過(guò)敏與免疫研究中心;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(編號(hào):81273245)
【分類號(hào)】:R378.911

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):1989414


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