本文選題：淋病奈瑟菌 + Cas蛋白　； 參考：《揚州大學(xué)學(xué)報(農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版)》2017年01期

【摘要】：為研究淋病奈瑟菌CRISPR系統(tǒng)中Cas蛋白的結(jié)構(gòu)與功能,以WHO-A株基因組DNA為模板,利用PCR技術(shù)克隆出CT和TM 2個Cas基因,在大腸埃希菌中進行原核表達。分別用pCold-TF表達的CT和TM重組蛋白免疫小鼠制備Cas抗體;以pGEX-6p-1表達的CT和TM重組蛋白為檢測抗原測定免疫血清中特異性抗體的效價。結(jié)果表明:獲得了與預(yù)期分子量大小一致的重組抗原,間接ELISA檢測表明,小鼠免疫血清中CT和TM抗體的效價分別為1∶25 600、1∶12 800。結(jié)果說明為細(xì)胞外探索淋病奈瑟菌中Cas蛋白的作用機制和細(xì)胞內(nèi)檢測相關(guān)蛋白的含量提供了試驗材料。
[Abstract]:In order to study the structure and function of Cas protein in CRISPR system of Neisseria gonorrhoeae, two Cas genes (CT and TM) were cloned by PCR using genomic DNA of WHO-A strain and expressed in E. coli. Cas antibody was prepared by immunizing mice with CT and TM recombinant protein expressed by pCold-TF, and the titer of specific antibody in immunized serum was detected by pGEX-6p-1 expressed CT and TM recombinant protein. The results showed that the recombinant antigen was obtained in accordance with the expected molecular weight. Indirect ELISA analysis showed that the titers of CT and TM antibodies in mouse immunized serum were 1:25 600: 1: 12800, respectively. The results showed that the results provided experimental materials for extracellular exploration of the mechanism of Cas protein in Neisseria gonorrhoeae and detection of related proteins in cells.
【作者單位】： 揚州大學(xué)醫(yī)學(xué)院/江蘇省中西醫(yī)結(jié)合老年病防治重點實驗室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項目(81471906) 江蘇省高校自然科學(xué)基金資助項目(14KJB310025) 揚州大學(xué)科技創(chuàng)新團隊培養(yǎng)對象資助項目(201609)
【分類號】：R392

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本文編號：1984140