本文選題：IL-b + 表達　； 參考：《中國比較醫(yī)學(xué)雜志》2017年03期

【摘要】：目的表達重組IL-37b蛋白并去除內(nèi)毒素,鑒定其活性。方法構(gòu)建原核表達載體p ET28/IL-37b,轉(zhuǎn)化大腸桿菌感受態(tài)細胞;經(jīng)IPTG誘導(dǎo)表達的重組蛋白由Ni2+-NTA凝膠進行變性條件下的親和層析純化;用SDS-PAGE分析、考馬斯亮藍染色鑒定重組蛋白是否為目的蛋白;去除蛋白中原核表達所產(chǎn)生的內(nèi)毒素;將蛋白作用于受LPS刺激的RAW 264.7細胞,收集培養(yǎng)上清,通過ELISA方法檢測IL-6的表達水平,鑒定蛋白的生物學(xué)活性。結(jié)果表達了純度較好的重組IL-37b蛋白,降低了其中原核表達所產(chǎn)生的內(nèi)毒素,經(jīng)鑒定其具備良好的生物學(xué)活性。結(jié)論成功表達了具備良好生物學(xué)活性的IL-37b蛋白。
[Abstract]:Objective to express recombinant IL-37b protein, remove endotoxin and identify its activity. Methods the prokaryotic expression vector pET28 / IL-37b was constructed and transformed into Escherichia coli receptive cells. The recombinant protein induced by IPTG was purified by affinity chromatography under denaturation conditions by Ni2 -NTA gel. Coomassie brilliant blue staining was used to identify whether the recombinant protein was the target protein; to remove the endotoxin produced by prokaryotic expression in the protein; to act the protein on the RAW 264.7 cells stimulated by LPS; to collect the culture supernatant; and to detect the expression level of IL-6 by ELISA method. To identify the biological activity of the protein. Results the recombinant IL-37b protein with good purity was expressed and the endotoxin produced by prokaryotic expression was reduced. Conclusion IL-37b protein with good biological activity was successfully expressed.
【作者單位】： 中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)實驗動物研究所;
【基金】：中央級公益性科研院所基本科研業(yè)務(wù)費
【分類號】：R378

【參考文獻】

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本文編號：1966367