PreS-Tat真核表達載體的構(gòu)建及表達
本文選題:PreS + Tat ; 參考:《鄭州大學學報(醫(yī)學版)》2011年05期
【摘要】:目的:構(gòu)建pEGFP-PreS-Tat嵌合載體并在真核細胞中表達。方法:提取人乙型肝炎病毒并用PCR法擴增出PreS片段,定向克隆入pEGFP-C3載體,在PreS下游連接合成的Tat序列,構(gòu)建成功的pEGFP-PreS-Tat質(zhì)粒經(jīng)脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染Hela細胞,Westernblot鑒定目的蛋白的表達。結(jié)果:酶切和測序結(jié)果表明成功地構(gòu)建了pEGFP-PreS-Tat嵌合載體,WesternBlot結(jié)果表明該載體能在Hela細胞中表達pEGFP-PreS-Tat融合蛋白。結(jié)論:成功構(gòu)建pEG-FP-PreS-Tat載體并表達出相應(yīng)的融合蛋白,為研究該融合蛋白的功能奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:Objective: to construct pEGFP-PreS-Tat chimeric vector and express it in eukaryotic cells. Methods: human hepatitis B virus (HBV) PreS fragment was amplified by PCR and cloned into pEGFP-C3 vector. The recombinant pEGFP-PreS-Tat plasmid was constructed by lipofectin transfection into Hela cells to identify the expression of the target protein by Western blot. Results: pEGFP-PreS-Tat chimeric vector was successfully constructed by restriction endonuclease digestion and sequencing. The results showed that the vector could express pEGFP-PreS-Tat fusion protein in Hela cells. Conclusion: the pEG-FP-PreS-Tat vector was successfully constructed and the corresponding fusion protein was expressed, which laid a foundation for studying the function of the fusion protein.
【作者單位】: 鄭州大學第一附屬醫(yī)院藥學部;鄭州大學第一附屬醫(yī)院感染科;鄭州大學護理學院;
【基金】:國家自然科學基金資助項目30472031
【分類號】:R373
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