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促紅細(xì)胞生成素對(duì)腎間質(zhì)纖維化大鼠腎臟保護(hù)作用的研究

發(fā)布時(shí)間:2018-05-30 12:47

  本文選題:UUO大鼠 + 腎間質(zhì)纖維化; 參考:《山西醫(yī)科大學(xué)》2012年碩士論文


【摘要】:目的:研究幼年大鼠單側(cè)輸尿管梗阻模型(UUO模型)所制備的患側(cè)腎間質(zhì)纖維化中,給予重組人促紅細(xì)胞生成素(rh-EPO)干預(yù)后,,α-平滑肌動(dòng)蛋白(α-SMA)、轉(zhuǎn)化生長因子-β1(TGF-β1)及血管內(nèi)皮生長(VEGF)的表達(dá)趨勢(shì)及變化情況,并探討其對(duì)大鼠腎間質(zhì)纖維化的影響及可能的作用機(jī)制。 方法:采用單側(cè)輸尿管結(jié)扎造成大鼠患側(cè)腎間質(zhì)纖維化,2-3周齡SD大鼠72只,隨機(jī)分成對(duì)照組即A組(僅分離輸尿管,不結(jié)扎,腹腔注射生理鹽水)、模型組即B組(造模,腹腔注射生理鹽水)、模型干預(yù)組即C組(造模,腹腔注射rh-EPO100IU/Kg,3次/周)。于術(shù)后3、7、14天各組分別處死8只大鼠,取患側(cè)腎做組織學(xué)檢查,HE、Masson染色光鏡下觀察腎組織病理學(xué)變化,用免疫組化方法檢測(cè)腎組織中α-SMA、TGF-β1、VEGF蛋白的表達(dá)及變化趨勢(shì),所得數(shù)據(jù)采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理。 結(jié)果:(1)病理變化:HE染色顯示:A組大鼠腎組織結(jié)構(gòu)未見明顯變化。B組于術(shù)后3天出現(xiàn)腎小管輕度擴(kuò)張,間質(zhì)中少量單核細(xì)胞與淋巴細(xì)胞浸潤;7天時(shí)可見腎小管擴(kuò)張較前明顯,偶見腎小管萎縮,同時(shí)可見腎小管上皮細(xì)胞變性、水腫、甚至壞死,腎間質(zhì)炎癥細(xì)胞浸潤增多;14天上述病變繼續(xù)加重,間質(zhì)細(xì)胞及細(xì)胞外基質(zhì)成分增多,纖維化程度較明顯。與同期B組相比,C組大鼠腎小管擴(kuò)張程度、間質(zhì)中單核細(xì)胞及淋巴細(xì)胞浸潤的程度有所減輕;與同期A組相比,C組大鼠腎臟病變程度仍較高。Masson染色顯示:A組大鼠腎小管間質(zhì)內(nèi)未見明顯陽染。隨著梗阻時(shí)間的延長B組大鼠腎組織膠原纖維增加,染色面積逐漸增多。與同期B組比較,C組大鼠腎小管間質(zhì)纖維化程度明顯減輕,膠原纖維陽染面積減少(P㩳0.05),但其程度仍高于同期A組(P㩳0.05)。(2)免疫組化結(jié)果顯示:A組中α-SMA、TGF-β1在腎小管上皮細(xì)胞中有少量表達(dá);于B組和C組中α-SMA、TGF-β1隨著梗阻時(shí)間的延長表達(dá)水平逐漸上調(diào),到14天表達(dá)最明顯;C組中兩種蛋白較B組同時(shí)間點(diǎn)的表達(dá)水平均明顯下調(diào)(P㩳0.05),但各時(shí)間點(diǎn)表達(dá)水平仍明顯高于A組(P㩳0.05);VEGF于腎小管上皮細(xì)胞及足突細(xì)胞中廣泛表達(dá),隨著梗阻時(shí)間的延長,B組和C組中VEGF的表達(dá)均明顯下調(diào),但C組較B組各時(shí)間點(diǎn)的表達(dá)水平有所上調(diào),但仍低于A組(P㩳0.05)。A組中三種蛋白的表達(dá)水平無明顯變化,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P㩳0.05)。結(jié)論:研究顯示α-SMA、TGF-β1蛋白的表達(dá)上調(diào)及VEGF蛋白的表達(dá)下調(diào)在腎間質(zhì)纖維化的發(fā)展中具有重要的意義,用EPO干預(yù)后可能通過下調(diào)UUO模型大鼠腎組織中α-SMA、TGF-β1的蛋白表達(dá),及上調(diào)VEGF蛋白的表達(dá)水平,從而具有延緩腎小管間質(zhì)纖維化進(jìn)展,保護(hù)腎臟的作用。
[Abstract]:Objective: to study the process of renal interstitial fibrosis induced by unilateral ureteral obstruction (UUO) in juvenile rats. After treated with recombinant human erythropoietin (rh-EPO), the expression trends and changes of 偽 -smooth muscle actin (偽 -SMA-TGF- 尾 1) and vascular endothelial growth factor (VEGF-1) were investigated, and the effects and possible mechanisms of 偽 -smooth muscle actin (TGF- 尾 _ 1) on renal interstitial fibrosis in rats were investigated. Methods: 72 SD rats of 2-3 weeks old with unilateral ureteral ligation were randomly divided into two groups: group A (isolated ureter, no ligation, intraperitoneal injection of normal saline), model group B (model group). Group C was treated with intraperitoneal injection of normal saline. The rats in group C were given intraperitoneal injection of rh-EPO100 IUP / KgN 3 times per week. On the 14th day after operation, 8 rats were killed in each group. The pathological changes of renal tissue were observed under light microscope with HE Masson staining, and the expression of 偽 -SMATGF- 尾 1 VEGF protein in renal tissue was detected by immunohistochemical method. The data were processed by SPSS17.0 software. Results the pathological changes showed that there was no obvious change in the renal tissue structure of the rats in group A. the renal tubule dilated slightly in group B on the 3rd day after operation, and the renal tubule dilatation was more obvious at 7 days after infiltration of a small amount of monocytes and lymphocytes in the interstitial tissue. Tubule atrophy was seen occasionally, and tubule epithelial cell degeneration, edema, and even necrosis, infiltration of renal interstitial inflammatory cells increased 14 days, interstitial cells and extracellular matrix increased, fibrosis degree was obvious. Compared with group B, the degree of renal tubule dilatation and the infiltration of monocytes and lymphocytes in interstitial tissue of rats in group C decreased. Compared with group A, the degree of renal lesion in group C was still higher. Masson staining showed that there was no obvious positive staining in tubulointerstitium of rats in group A. With the prolongation of obstruction time, the collagen fibers in renal tissue of group B increased and the staining area gradually increased. Compared with group B, the degree of renal tubulointerstitial fibrosis in group C was significantly reduced, and the area of positive staining of collagen fibers was decreased, but the degree was still higher than that in group A. The immunohistochemical results showed that 偽 -SMA-TGF- 尾 1 was expressed in a small amount in renal tubular epithelial cells. In group B and group C, the expression of 偽 -SMA-TGF- 尾 1 gradually increased with the prolongation of obstruction time. At the 14th day, the expression level of two proteins in group C was significantly lower than that in group B at the same time point, but the expression level of VEGF was still significantly higher than that of group A at the same time point, but the expression of VEGF in renal tubular epithelial cells and podocyte cells was significantly higher than that in group A. With the prolongation of the time of obstruction, the expression of VEGF in group B and group C was significantly down-regulated, but the expression level of VEGF in group C was up-regulated than that in group B, but still lower than that in group A (group A). There was no significant change in the expression of three proteins in group A. The difference was not statistically significant. Conclusion: the up-regulation of 偽 -SMA-TGF- 尾 1 protein and the down-regulation of VEGF protein may play an important role in the development of renal interstitial fibrosis. The expression of 偽 -SMA-TGF- 尾 1 protein may be down-regulated by the intervention of EPO. And up-regulate the expression of VEGF protein, which can delay the progression of tubulointerstitial fibrosis and protect the kidney.
【學(xué)位授予單位】:山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2012
【分類號(hào)】:R363

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本文編號(hào):1955354

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