本文選題：Ⅱ型皰疹病毒 + 病毒入侵機制�。� 參考：《安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)》2011年碩士論文

【摘要】：皰疹病毒是一種常見病原微生物，在自然界中能感染眾多宿主。單純皰疹病毒（Herpes simplex virus type， HSV）是皰疹病毒科α亞科，其復(fù)制周期短，繁殖速度快。根據(jù)血清型分類，HSV分為兩個種類，分別是I型單純皰疹病毒（HSV-1）和Ⅱ型單純皰疹病毒（HSV-2）。HSV-1易感染人的口腔以及眼上皮細胞，導(dǎo)致口腔皰疹、單純皰疹病毒性角膜炎等疾病。HSV-2則主要感染人的生殖系統(tǒng)，引起生殖器皰疹。該性病的發(fā)病率僅次于淋病和梅毒。HSV-1和HSV-2均能潛伏感染神經(jīng)細胞。 不論是HSV-1還是HSV-2，單純皰疹病毒感染細胞都離不開三個過程：粘附、受體結(jié)合、融合。在這三個過程中，HSV囊膜上的糖蛋白起到了重要作用。gC和gB與受體結(jié)合后使得病毒的囊膜和細胞的脂質(zhì)膜靠近，從而病毒粘附在細胞上。gD與nectin-1/nectin-2、HVEM、3-O-硫酸乙酰肝素、gB與PILRα、Non-muscle myosin ⅡA進行受體識別和結(jié)合。之后形成的gD、gB、gH和gL的四元復(fù)合物引發(fā)膜融合。 其中g(shù)D在病毒與宿主細胞的膜融合過程中作用關(guān)鍵。根據(jù)已經(jīng)解析的HSV-1gD以及其與受體HVEM的復(fù)合體的結(jié)構(gòu)發(fā)現(xiàn)，gD的C端回折纏繞在N端的受體結(jié)合位點，但當(dāng)受體結(jié)合時，C端讓出該結(jié)合位點。而C端與gB、gH和gL形成融合符合物。 由于HSV-1和HSV-2二者感染的細胞不同，并且不同株系病毒的囊膜蛋白gD選擇的受體也有所不同。為了了解HSV-1gD和HSV-2gD在受體選擇上的差異，需要進一步研究這兩種蛋白與其受體結(jié)合的細節(jié)。而目前所得到的gD蛋白結(jié)構(gòu)僅是HSV-1KOS株的gD（1-259）、（1-306）以及與HVEM的復(fù)合物結(jié)構(gòu)，并沒有HSV-2gD的結(jié)構(gòu)。 故在本文中利用桿狀病毒表達系統(tǒng)表達出HSV-2stain333的gD蛋白的胞外部分區(qū)域（1-285aa），經(jīng)過Ni-NTA親和層析以及分子排阻層析純化后，濃縮至5mg/ml和10mg/ml，，進行懸滴氣相擴散法篩選蛋白晶體的生長條件，并得到初篩的晶體。在初篩的晶體生長條件下進行優(yōu)化。優(yōu)化后的晶體生長條件為0.1M Hepes pH7.2,5%(v/v) MPD，10%PEG10000，18o C。經(jīng)過X-射線衍射后，得到了分辨率為1.8的一套晶體衍射數(shù)據(jù)。分析后的數(shù)據(jù)顯示晶體屬于P21空間群，晶胞參數(shù)為a=63.6, b=55.4, c=65.3, β=96.3°。
[Abstract]:Herpesvirus is a common pathogenic microorganism that can infect many hosts in nature. Herpes simplex virus type, HSV) is a subfamily of herpes viridae. According to the serotype classification, HSV can be divided into two types: type I herpes simplex virus (HSV-1) and herpes simplex virus type II (HSV-2A). HSV-1 is susceptible to infection of human oral and ocular epithelial cells, leading to oral herpes. Herpes simplex virus keratitis and other diseases. HSV-2 is mainly infected with the human reproductive system, causing genital herpes. The incidence of STDs is second only to gonorrhea and syphilis. HSV-1 and HSV-2 can potentially infect nerve cells. Whether HSV-1 or HSV-2, herpes simplex virus infection can not be separated from three processes: adhesion, receptor binding, and fusion. In these three processes, glycoproteins on HSV capsule play an important role. GC and GB bind to the receptor to make the envelope of the virus and the lipid membrane of the cells close to each other. Therefore, the virus adheres to the cells. GD and nectin-1 / 1 / nectin-2 HVEMN 3-O- heparin sulfate (heparin) B and PILR 偽 Non-muscle myosin 鈪

本文編號：1900138