本文選題：腹膜透析 + 血管新生��； 參考：《南昌大學(xué)》2011年碩士論文

【摘要】：目的：眾所周知,長期的腹膜透析會導(dǎo)致腹膜功能逐漸出現(xiàn)衰退,最終導(dǎo)致超濾衰竭,使得尿毒癥患者最終不得已退出腹膜透析。新近研究發(fā)現(xiàn),腹膜發(fā)生血管新生是患者腹膜功能衰退的主要原因之一。本實驗旨在通過建立尿毒癥腹膜透析大鼠模型,了解其腹膜組織血管生成素及其受體的表達(dá)情況以及引起血管生成素及其受體變化的影響因素,以探討腹膜新生血管的發(fā)生機制。 方法：選取健康SD雄性大鼠30只,體重約為180-220g,均購于江西省中醫(yī)院醫(yī)學(xué)動物實驗中心。適應(yīng)性喂養(yǎng)一周以后,隨機選取其中22只大鼠建立經(jīng)典的5/6腎切除術(shù)尿毒癥模型,造模四周后采集大鼠尾靜脈測血肌酐、尿素氮值,腎切除術(shù)后4周,造模成功的大鼠腹腔內(nèi)予植入自制的腹透管,隨機分為尿毒癥組(NS組)及腹透組(PD組)。尿毒癥組每日給予20ml生理鹽水腹腔灌注,腹透組則每日給予20ml 4.25%百特腹透液腹腔灌注,共持續(xù)六周。余下未造模的8只大鼠擬為對照組(C組),行假手術(shù)且不予任何液體灌注。所有的大鼠均正常飲食飲水,灌液六周后取大鼠腹膜組織,觀察腹膜血管新生情況；免疫組織化學(xué)染色及逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)(reverse transcription-polymerise chain reaction, RT-PCR)檢測腹膜組織血管生成素及其受體的表達(dá)變化。 結(jié)果：(1)實驗表明PD組相對其他兩組新生血管數(shù)顯著增多,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);NS組新生血管數(shù)較C組為多,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。(2)免疫組化顯示各組大鼠血管生成素1(Angpt-1)陽性細(xì)胞數(shù)比較P0.05,無統(tǒng)計學(xué)意義；血管生成素2(Angpt-2)及其受體2(Tie-2)陽性細(xì)胞數(shù)PD組相對于C組和NS組顯著增加,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)；NS組較C組亦有增加,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。(3)RT-PCR顯示Angpt-1mRNA條帶半定量分析結(jié)果在三組間無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)；PD組Angpt-2 mRNA和Tie-2mRNA條帶深于其他兩組,半定量分析差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);NS組Angpt-2 mRNA和Tie-2 mRNA半定量分析結(jié)果高于C組,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。(4) Angpt-2陽性細(xì)胞數(shù)與腹膜新生血管數(shù)之間存在直線正相關(guān)關(guān)系(P0.05, R0.855); Angpt-2mRNA半定量分析結(jié)果與腹膜新生血管數(shù)之間亦呈直線正相關(guān)關(guān)系(P0.05,R0.742)。 結(jié)論：尿毒癥狀態(tài)及腹膜透析液均會上調(diào)腹膜血管生成素-2及其受體的表達(dá),但未見血管生成素1的表達(dá)出現(xiàn)明顯變化。腹膜血管生成素-2及其受體的表達(dá)與腹膜血管新生密切相關(guān)。
[Abstract]:Objective: it is well known that long-term peritoneal dialysis can lead to gradual decline of peritoneal function and eventually to ultrafiltration failure, which makes uremic patients finally have to withdraw from peritoneal dialysis. Recent studies have found that peritoneal angiogenesis is one of the main causes of peritoneal dysfunction in patients. The purpose of this study was to investigate the expression of angiopoietin and its receptors in peritoneal tissues and the factors affecting the changes of angiopoietins and their receptors by establishing a rat model of peritoneal dialysis with uremia. To explore the mechanism of peritoneal neovascularization. Methods: 30 healthy male SD rats, weighing 180-220 g, were purchased from the Medical Animal experiment Center of Jiangxi traditional Chinese Medicine Hospital. After one week of adaptive feeding, 22 of them were randomly selected to establish the classic 5 / 6 nephrectomy uremic model. The blood creatinine, urea nitrogen and blood urea nitrogen were collected from the tail vein of the rats for 4 weeks after nephrectomy. The successful rats were implanted into abdominal cavity and randomly divided into uremia group (NS group) and peritoneal dialysis group (PD group). The uremic group was intraperitoneally perfused with 20ml saline and the peritoneal dialysis group with 20ml 4.25 hundred per day for six weeks. The remaining 8 rats were selected as control group C, sham-operated without any fluid infusion. All the rats were fed and drinking normal diet. After 6 weeks of perfusion, the peritoneal tissues were taken out to observe the situation of peritoneal angiogenesis. Immunohistochemical staining and reverse transcription-polymerise chain reaction (RT-PCR) were used to detect the expression of angiopoietin and its receptor in peritoneal tissues. Results compared with the other two groups, the number of neovascularization in PD group was significantly higher than that in the other two groups, and the difference was statistically significant (P 0.05) the number of neovascularization in NS group was higher than that in C group. The number of Angiopoietin-1Angpt-1) positive cells in each group was not significantly higher than that of P0.05, and the number of Angiopoietin-2Angpt-2) and its receptor 2tie-2) in PD group was significantly higher than that in C group and NS group. The results of semi-quantitative analysis of Angpt-1mRNA bands showed that there was no significant difference between the three groups in the Angpt-2 mRNA and Tie-2mRNA bands in the PD group, and the Angpt-2 mRNA and Tie-2mRNA bands in the PD group were deeper than those in the other two groups. The difference of semi-quantitative analysis was statistically significant. The results of Angpt-2 mRNA and Tie-2 mRNA in NS group were higher than those in C group. There was a linear positive correlation between the number of Angpt-2 positive cells and the number of peritoneal neovascularization (P0.05, R0.855), and there was also a linear positive correlation between the semi-quantitative analysis of Angpt-2mRNA and the number of peritoneal neovascularization. Conclusion: both uremia and peritoneal dialysate can up-regulate the expression of angiopoietin-2 and its receptor, but there is no obvious change in the expression of angiopoietin-1. The expression of angiopoietin-2 and its receptor is closely related to peritoneal angiogenesis.
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號】：R692.5;R-332

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本文編號：1876650