本文選題：APOBECB + 脫氨基　； 參考：《重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)》2017年07期

【摘要】：目的:篩選參與APOBEC3B羧基端脫氨酶及抗乙肝病毒(hepatitis B virus,HBV)活性的重要區(qū)域和關(guān)鍵位點(diǎn)。方法:定點(diǎn)突變構(gòu)建羧基端活性中心附近的3個(gè)螺旋區(qū)段(α2、α3、α4)的缺失突變體和α4螺旋區(qū)內(nèi)(D316、K320、E321、R327、D328)位點(diǎn)的突變體;Southern blot篩選APOBEC3B抑制HBV復(fù)制的重要區(qū)段和關(guān)鍵位點(diǎn);不同DNA變性PCR(differential DNA denaturation PCR,3D-PCR)和克隆測(cè)序進(jìn)行驗(yàn)證。結(jié)果:APOBEC3B羧基端脫氨酶活性中心周圍的α3和α4螺旋區(qū)缺失后,其抗病毒活性消失;D316位點(diǎn)突變后APOBEC3B的脫氨酶活性和抗病毒活性消失。結(jié)論:APOBEC3B羧基端的D316位點(diǎn)是APOBEC3B脫氨酶和抗病毒的關(guān)鍵位點(diǎn)。
[Abstract]:Aim: to screen the important regions and key sites involved in the activities of APOBEC3B carboxyl terminal deaminase (APOBEC3B) and anti hepatitis B virus (HBV). Methods: three deletion mutants (偽 _ 2, 偽 _ 3, 偽 _ 4) were constructed by site-directed mutagenesis. Southern blot was used to screen the important regions and key sites of APOBEC3B for inhibiting HBV replication. Different DNA denaturation PCR(differential DNA denaturation PCR3 D-PCR) and clone sequencing were verified. Results the antiviral activity of APOBEC3B disappeared after the deletion of 偽 3 and 偽 4 helical region around the carboxyl terminal deaminase activity center of 1: APOBEC3B. The deaminase activity and antiviral activity of APOBEC3B disappeared after mutation at D316 site. Conclusion the D316 site of the carboxyl terminal of APOBEC3B is the key site of APOBEC3B deaminase and antivirus.
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)感染性疾病分子生物學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;重慶醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病原微生物教研室;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(編號(hào):81471945) 重慶市科委自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(編號(hào):cstc2014jcyj A10075) 重慶市教委科學(xué)技術(shù)研究資助項(xiàng)目(編號(hào):KJ1600205)
【分類號(hào)】：R373

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本文編號(hào)：1861480