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人胚胎干細(xì)胞向內(nèi)皮細(xì)胞的分化誘導(dǎo)

發(fā)布時間:2018-05-06 21:45

  本文選題:干細(xì)胞 + 胚胎干細(xì)胞。 參考:《中國組織工程研究》2016年23期


【摘要】:背景:人胚胎干細(xì)胞是一類特殊的細(xì)胞,具有自我更新及多向分化潛力,在一定誘導(dǎo)條件下能夠分化為內(nèi)皮細(xì)胞。目的:探討人胚胎干細(xì)胞向內(nèi)皮細(xì)胞分化的條件,研究血管內(nèi)皮生長因子誘導(dǎo)人胚胎干細(xì)胞誘導(dǎo)分化為內(nèi)皮細(xì)胞的效果。方法:取40代H9細(xì)胞進(jìn)行復(fù)蘇,采用懸浮培養(yǎng)法制備胚體,培養(yǎng)5 d后轉(zhuǎn)入貼壁培養(yǎng)階段,分化為擬胚體,添加含50μg/L血管內(nèi)皮生長因子的胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)基進(jìn)行誘導(dǎo)培養(yǎng)。取誘導(dǎo)分化第2代細(xì)胞,進(jìn)行DiI-Ac-LDL攝取實驗;取誘導(dǎo)分化第15代細(xì)胞,進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色。結(jié)果與結(jié)論:(1)培養(yǎng)1 d時,可見條索或多角形的單層細(xì)胞在擬胚體細(xì)胞周圍呈芽樣放射狀生長,細(xì)胞生長相對迅速,能夠與周圍集落的細(xì)胞相互融合;培養(yǎng)二三天后,懸浮細(xì)胞數(shù)得到進(jìn)一步增加,但中心小圓形細(xì)胞開始死亡;培養(yǎng)5 d后,擬胚體細(xì)胞開始傳代,細(xì)胞聚集呈現(xiàn)出典型鋪路石樣外觀;(2)經(jīng)過誘導(dǎo)分化后,部分人胚胎干細(xì)胞能夠主動攝取熒光標(biāo)記LDL,且細(xì)胞呈現(xiàn)為紅色熒光顆粒;(3)免疫組化染色顯示,誘導(dǎo)分化的第15代人胚胎干細(xì)胞呈CD31和FLK-1陽性;(4)結(jié)果表明:人胚胎干細(xì)胞在血管內(nèi)皮生長因子誘導(dǎo)下可分化為內(nèi)皮細(xì)胞。
[Abstract]:Background: human embryonic stem cells (human embryonic stem cells) are a special type of cells with potential for self renewal and multidirectional differentiation and can be differentiated into endothelial cells under certain induction conditions. Methods: the 40 generation H9 cells were recovered and the embryos were prepared by suspension culture method. After 5 d, the cells were transferred into the adherent culture stage and differentiated into embryoid bodies. The embryonic stem cell culture medium containing 50 mu g/L vascular endothelial growth factor was added to the culture medium for induction and differentiation of second generation cells, and DiI-Ac-LDL uptake experiments were carried out, and fifteenth generation cells were induced to be induced. Results and conclusions: (1) when the culture of 1 D, the monolayer cells of the cord or polygon showed a bud like growth around the embryoid cells, the cell growth was relatively rapid, and the cells could be fused with the surrounding colonies. After two or three days, the number of suspended cells was further increased, but the central small round cells were increased. After 5 d, the embryo somatic cells began to pass through the generation, and the cell aggregation showed a typical paved stone appearance. (2) after differentiation, some human embryonic stem cells could take the active uptake of fluorescent labeling LDL and the cells were red fluorescent particles; (3) the immuno histochemical staining showed that the differentiated fifteenth generation embryonic stem cells were CD31 and the induced differentiation. FLK-1 positive; (4) the results showed that human embryonic stem cells could be differentiated into endothelial cells induced by vascular endothelial growth factor.

【作者單位】: 河南理工大學(xué)醫(yī)學(xué)院;
【分類號】:R329.2

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本文編號:1854033

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