本文選題：高血糖 + 肝纖維化　； 參考：《瀘州醫(yī)學(xué)院》2012年碩士論文

【摘要】：目的：肝纖維化是各種原因引起肝內(nèi)結(jié)締組織增生的病理過(guò)程。以膠原為主的細(xì)胞外基質(zhì)(extracellular matrix, ECM)蛋白合成、降解和沉積不平衡是肝纖維化發(fā)生的主要機(jī)制。參與ECM蛋白分解代謝的重要酶是基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinases, MMPs)，其中間質(zhì)膠原酶MMP-1，可以降解ECM為主的Ⅰ、Ⅱ型膠原。MMPs特異性受金屬蛋白酶組織抑制劑(tissue inhibitors of matrixmetalloproteinases, TIMPs)的調(diào)控，TIMP-1對(duì)MMP-1有特異性抑制作用，所以TIMP-1/MMP-1系統(tǒng)平衡在肝纖維化中有重要意義。糖尿病是常見的代謝性疾病，高血糖是糖尿病的重要表現(xiàn)。研究表明，高血糖對(duì)肝臟纖維化有明顯的促進(jìn)作用。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)建立糖尿病肝纖維化模型大鼠，探討高血糖加重肝纖維化發(fā)生的可能機(jī)制，為臨床上糖尿病相關(guān)肝纖維化的防治提供實(shí)驗(yàn)思路和新的方向。方法：將60只雄性健康SD大鼠隨機(jī)分為四組：對(duì)照組、糖尿病組、肝纖維化組、糖尿病肝纖維化組(雙模型組)各15只。糖尿病組和雙模型組大鼠腹腔注射35mg/kg鏈尿佐菌素(streptozocin, STZ)檸檬酸鹽緩沖液建立糖尿病模型,48小時(shí)尾靜脈采血檢測(cè)血糖大于16.7mmol/L確定為糖尿病造模成功；一周后肝纖維化組.雙模型組大鼠皮下注射40％CCL_4花生油溶液0.4ml/kg，以后每隔3天皮下注射40％CCL_4花生油0.2ml/kg，對(duì)照組以同體積的檸檬酸鹽和花生油溶液代替，共8周。在末次注射CCL_43天后，心臟采血收集血清，用自動(dòng)生化檢測(cè)儀檢測(cè)血清中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、白蛋白(ALB)和白蛋白/球蛋白(A/G)；用化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)肝纖維化指標(biāo)透明質(zhì)酸(HA)、層連蛋白(LN)、Ⅲ型前膠原(PⅢNP)和Ⅳ型膠原(C-Ⅳ)；各組大鼠進(jìn)行肝組織蘇木素-伊紅(hematoxylin-eosin, HE)染色并觀察肝細(xì)胞變性壞死和纖維化的程度；Van Gieson (VG)染色觀察肝組織中膠原增生的程度；免疫組織化學(xué)檢測(cè)PAI-1蛋白表達(dá)的水平；Real-Time PCR檢測(cè)肝臟組織α-SMA、MMP-1和TIMP-1基因的表達(dá)水平。結(jié)果：1.與對(duì)照組和糖尿病組相比，肝纖維化組、雙模型組大鼠血清中ALT、AST明顯升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；和肝纖維化組比較，雙模型組大鼠中ALT、AST升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；和對(duì)照組和糖尿病組相比，肝纖維化組、雙模型組大鼠血清中ALB、A/G下降，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。2.與對(duì)照組和糖尿病組相比，肝纖維化組和雙模型組大鼠血清中HA、LN、PⅢNP、C-Ⅳ濃度明顯升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；與肝纖維化組比較，雙模型組大鼠血清中的HA、C-Ⅳ濃度升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。3.與肝纖維化組比較，雙模型組大鼠的肝臟纖維化積分增高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。4.與對(duì)照組和糖尿病組相比，肝纖維化、雙模型組大鼠中的PAI-1蛋白表達(dá)明顯升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；與肝纖維化組比較，雙模型組大鼠中的PAI-1蛋白表達(dá)明顯升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。5.與對(duì)照組和糖尿病組相比，肝纖維化組、雙模型組中的α-SMAmRNA明顯升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；與肝纖維組比較，雙模型組中的α-SMAmRNA升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。6.與對(duì)照組和糖尿病組相比，肝纖維化組、雙模型組中TIMP-1、TIMP-1/MMP-1的基因表達(dá)升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；與肝纖維組比較，雙模型組中TIMP-1、TIMP-1/MMP-1的基因表達(dá)升高，，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。結(jié)論：1.高血糖促進(jìn)和加重肝纖維化,主要表現(xiàn)為肝功能水平降低和血清纖維化指標(biāo)水平增加及肝臟內(nèi)膠原增生加重。2.高血糖可促進(jìn)肝臟中HSC活化、增殖，促進(jìn)PAI-1表達(dá)，引起TIMP-1分泌增多，二者共同抑制MMP-1加重肝纖維化。3.高血糖加重肝纖維化的發(fā)生機(jī)制，可能是通過(guò)上調(diào)TIMP-1/MMP-1平衡來(lái)加重ECM的沉積。
[Abstract]:Objective : To investigate the pathological process of liver fibrosis caused by hepatic fibrosis . It is a main mechanism for the synthesis , degradation and deposition of collagen - based extracellular matrix ( ECM ) protein . The mechanism of MMP - 1 and TIMP - 1 in liver fibrosis is a common metabolic disease .
After the last injection , 40 % CCL _ 4 peanut oil was injected subcutaneously for 8 weeks . After the last injection of CCL _ 43 , serum was collected from heart blood collection , AST , ALB and albumin / globulin were detected by automatic biochemical detector .
The hepatic fibrosis index hyaluronic acid ( HA ) , laminin ( LN ) , type 鈪

本文編號(hào)：1825176