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T3對(duì)無(wú)血清培養(yǎng)成年鼠心肌細(xì)胞的保護(hù)作用及Fas系統(tǒng)相關(guān)機(jī)制研究

發(fā)布時(shí)間:2018-04-29 00:23

  本文選題:T3 + 大鼠。 參考:《南昌大學(xué)》2011年碩士論文


【摘要】:目的:建立體外無(wú)血清饑餓培養(yǎng)成年鼠心肌細(xì)胞模型,利用藥物三碘甲狀腺原氨酸(T3)干預(yù),觀察T3對(duì)無(wú)血清培養(yǎng)成年鼠心肌細(xì)胞是否具有保護(hù)作用及與Fas系統(tǒng)表達(dá)的關(guān)系。 方法:無(wú)血清M199培養(yǎng)基原代培養(yǎng)成年鼠心肌細(xì)胞,光鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),臺(tái)盼藍(lán)染色評(píng)價(jià)細(xì)胞活性、計(jì)數(shù),心肌細(xì)胞隨機(jī)分為對(duì)照組、T3組,培養(yǎng)48小時(shí)后,流式細(xì)胞儀檢測(cè)心肌細(xì)胞凋亡,Western blotting測(cè)定Fas、FasL蛋白在心肌細(xì)胞的表達(dá)變化。 結(jié)果:每只成年SD大鼠細(xì)胞產(chǎn)量可獲得(4-7)x 106個(gè),其中75%-85%復(fù)鈣后為具有活性的心室肌細(xì)胞,細(xì)胞呈桿狀、橫紋清晰、折光性好、兩端邊緣銳利,其中5%-10%桿狀細(xì)胞有自發(fā)性收縮;T3對(duì)無(wú)血清培養(yǎng)成年鼠心肌細(xì)胞具有保護(hù)作用:心肌細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)48小時(shí)后,流式細(xì)胞儀檢測(cè)心肌細(xì)胞凋亡T3組心肌細(xì)胞凋亡率(13.26±2.46%)較對(duì)照組(44.32±6.12%)明顯降低(P0.05);Western blotting檢測(cè)結(jié)果提示T3組較對(duì)照組Fas、FasL表達(dá)減弱。 結(jié)論:T3可以減少無(wú)血清培養(yǎng)成年鼠心肌細(xì)胞凋亡,可能與減弱心肌細(xì)胞Fas/FasL基因表達(dá)有關(guān)。
[Abstract]:Aim: to establish a model of cultured adult rat cardiomyocytes without serum starvation in vitro, and to observe the protective effect of T3 on serum free cultured adult rat cardiomyocytes and its relationship with the expression of Fas system with the intervention of triiodothyronine (T3). Methods: primary cultured adult rat cardiomyocytes were cultured on serum-free M199 medium. Cell morphology was observed under light microscope. Trypan blue staining was used to evaluate cell activity and count. Cardiomyocytes were randomly divided into control group (T 3 group) and cultured for 48 hours. The expression of Fas-FasL protein in cardiomyocytes was detected by flow cytometry and Western blotting. Results: the cell yield of each adult SD rat could be obtained by 4-7X 106, of which 75% -85% of them were active ventricular myocytes after recalcium. The cells were rod-shaped, clear striation, good refraction, sharp edge at both ends. Among them, 5-10% rod cells had spontaneous contraction of T _ 3, which had protective effect on adult rat cardiomyocytes cultured without serum: after 48 hours of serum-free culture of cardiac myocytes, The expression of Fas-FasL in T3 group was significantly lower than that in control group (44.32 鹵6.12) by flow cytometry. The results showed that the expression of Fas-FasL in T3 group was lower than that in control group. ConclusionThree 3 can reduce the apoptosis of cardiac myocytes in serum-free adult rats, which may be related to the decrease of Fas/FasL gene expression in cardiac myocytes.
【學(xué)位授予單位】:南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2011
【分類號(hào)】:R329

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本文編號(hào):1817557

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