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T3對無血清培養(yǎng)成年鼠心肌細胞的保護作用及Fas系統(tǒng)相關機制研究

發(fā)布時間:2018-04-29 00:23

  本文選題:T3 + 大鼠; 參考:《南昌大學》2011年碩士論文


【摘要】:目的:建立體外無血清饑餓培養(yǎng)成年鼠心肌細胞模型,利用藥物三碘甲狀腺原氨酸(T3)干預,觀察T3對無血清培養(yǎng)成年鼠心肌細胞是否具有保護作用及與Fas系統(tǒng)表達的關系。 方法:無血清M199培養(yǎng)基原代培養(yǎng)成年鼠心肌細胞,光鏡下觀察細胞形態(tài),臺盼藍染色評價細胞活性、計數(shù),心肌細胞隨機分為對照組、T3組,培養(yǎng)48小時后,流式細胞儀檢測心肌細胞凋亡,Western blotting測定Fas、FasL蛋白在心肌細胞的表達變化。 結果:每只成年SD大鼠細胞產量可獲得(4-7)x 106個,其中75%-85%復鈣后為具有活性的心室肌細胞,細胞呈桿狀、橫紋清晰、折光性好、兩端邊緣銳利,其中5%-10%桿狀細胞有自發(fā)性收縮;T3對無血清培養(yǎng)成年鼠心肌細胞具有保護作用:心肌細胞無血清培養(yǎng)48小時后,流式細胞儀檢測心肌細胞凋亡T3組心肌細胞凋亡率(13.26±2.46%)較對照組(44.32±6.12%)明顯降低(P0.05);Western blotting檢測結果提示T3組較對照組Fas、FasL表達減弱。 結論:T3可以減少無血清培養(yǎng)成年鼠心肌細胞凋亡,可能與減弱心肌細胞Fas/FasL基因表達有關。
[Abstract]:Aim: to establish a model of cultured adult rat cardiomyocytes without serum starvation in vitro, and to observe the protective effect of T3 on serum free cultured adult rat cardiomyocytes and its relationship with the expression of Fas system with the intervention of triiodothyronine (T3). Methods: primary cultured adult rat cardiomyocytes were cultured on serum-free M199 medium. Cell morphology was observed under light microscope. Trypan blue staining was used to evaluate cell activity and count. Cardiomyocytes were randomly divided into control group (T 3 group) and cultured for 48 hours. The expression of Fas-FasL protein in cardiomyocytes was detected by flow cytometry and Western blotting. Results: the cell yield of each adult SD rat could be obtained by 4-7X 106, of which 75% -85% of them were active ventricular myocytes after recalcium. The cells were rod-shaped, clear striation, good refraction, sharp edge at both ends. Among them, 5-10% rod cells had spontaneous contraction of T _ 3, which had protective effect on adult rat cardiomyocytes cultured without serum: after 48 hours of serum-free culture of cardiac myocytes, The expression of Fas-FasL in T3 group was significantly lower than that in control group (44.32 鹵6.12) by flow cytometry. The results showed that the expression of Fas-FasL in T3 group was lower than that in control group. ConclusionThree 3 can reduce the apoptosis of cardiac myocytes in serum-free adult rats, which may be related to the decrease of Fas/FasL gene expression in cardiac myocytes.
【學位授予單位】:南昌大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2011
【分類號】:R329

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