本文選題：鈉氫交換體(NHE) + 鈣蛋白酶(calpain)�。� 參考：《細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志》2017年01期

【摘要】：目的探討過表達(dá)鈉氫交換體1(NHE1)對RAW264.7細(xì)胞三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體A1(ABCA1)蛋白表達(dá)的影響。方法采用Ad NHE1腺病毒感染RAW264.7細(xì)胞,Western blot法檢測NHE1-EGFP融合蛋白的表達(dá),激光共聚焦顯微鏡技術(shù)檢測NHE1-EGFP融合蛋白細(xì)胞內(nèi)定位,酸負(fù)載p H回復(fù)檢測NHE1活性,Western blot法檢測NHE1-EGFP融合蛋白對RAW264.7細(xì)胞ABCA1蛋白水平及鈣蛋白酶(calpain)活性的影響,加入calpain抑制劑N-乙�；�-L-亮氨酰-L-亮氨酰-L-正亮氨酸(ALLN),Western blot法檢測肝臟X受體激動劑TO-901317誘導(dǎo)ABCA1蛋白表達(dá)水平的影響。結(jié)果 Ad NHE1腺病毒感染RAW264.7細(xì)胞后,高表達(dá)NHE1-EGFP融合蛋白,定位在細(xì)胞質(zhì)及細(xì)胞膜。NHE1-EGFP融合蛋白可降低ABCA1蛋白的表達(dá)水平并提高calpain活性,而calpain抑制劑ALLN能阻斷ABCA1蛋白表達(dá)水平降低。結(jié)論 NHE1過表達(dá)通過上調(diào)calpain活性而降低ABCA1蛋白表達(dá)水平。
[Abstract]:Aim to investigate the effect of overexpression of sodium hydrogen exchanger 1 (NHE1) on the expression of adenosine triphosphate binding cassette transporter A1 (A1) ABCA1 protein in RAW264.7 cells. Methods Ad NHE1 adenovirus infected RAW264.7 cells were used to detect the expression of NHE1-EGFP fusion protein by Western blot, and laser confocal microscopy was used to detect the intracellular localization of NHE1-EGFP fusion protein. The effect of NHE1-EGFP fusion protein on the level of ABCA1 protein and calpain activity in RAW264.7 cells was detected by Western blot assay. The effect of calpain inhibitor, N-acetyl-L-leucyl-L-leucine-L-leucine, on the expression of ABCA1 protein induced by TO-901317, a liver X receptor agonist, was detected by Western blot. Results after Ad NHE1 adenovirus infected RAW264.7 cells, the high expression of NHE1-EGFP fusion protein was found, which was located in cytoplasm and cell membrane. NHE1-EGFP fusion protein could decrease the expression level of ABCA1 protein and increase calpain activity, while calpain inhibitor ALLN could block the decrease of ABCA1 protein expression level. Conclusion overexpression of NHE1 can decrease the expression of ABCA1 protein by up-regulating the activity of calpain.
【作者單位】： 貴州醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院綜合病房;貴州醫(yī)科大學(xué)貴州省醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)重點實驗室;貴州醫(yī)科大學(xué)免疫學(xué)教研室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(31260250)
【分類號】：R363

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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本文編號：1814603