本文選題：柯薩奇病毒A型 + 假病毒　； 參考：《中國(guó)病毒病雜志》2016年01期

【摘要】：目的建立一種簡(jiǎn)單、快速、高通量的檢測(cè)柯薩奇病毒A組16型(CV-A16)中和抗體假病毒熒光定量檢測(cè)方法 (pseudovirus luciferase assay,PVLA)。方法首先構(gòu)建CV-A16核衣殼蛋白表達(dá)子及插入螢火蟲(chóng)熒光素酶報(bào)告基因的腸道病毒71型(EV-A71)復(fù)制子,再順次轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞,互補(bǔ)包裝得到CVA16假病毒。通過(guò)條件優(yōu)化并使用CV-A16國(guó)家中和抗體標(biāo)準(zhǔn)品,建立CV-A16中和抗體定量檢測(cè)方法(PVLA)。用該方法檢測(cè)15份CV-A16病毒免疫小鼠血清,并與傳統(tǒng)CPE法的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,比較兩種方法檢測(cè)結(jié)果的一致性。結(jié)果得到CV-A16假病毒,建立了CV-A16假病毒中和抗體檢測(cè)方法,該方法檢測(cè)CV-A16中和抗體滴度的結(jié)果與傳統(tǒng)CPE法的檢測(cè)結(jié)果高度一致(相關(guān)系數(shù)r2為0.91)。結(jié)論CV-A16假病毒中和抗體檢測(cè)方法可作為CPE法的替代方法,用于CV-A16中和抗體的快速檢測(cè)。
[Abstract]:Objective to establish a simple, rapid and high throughput method for the detection of pseudovirus luciferase assayayae of coxsackie virus A group 16 (CV-A16). Methods CV-A16 core-capsid protein expression and Enterovirus 71 EV-A71) replicon inserted into luciferase reporter gene of firefly were constructed, and then transfected into 293T cells in sequence. CVA16 pseudoviruses were obtained by complementary packaging. By optimizing the conditions and using the neutralizing antibody standard of CV-A16, a quantitative detection method for neutralizing antibody of CV-A16 was established. Fifteen sera of mice immunized with CV-A16 virus were detected by this method and compared with the results of traditional CPE method. Results CV-A16 pseudovirus was obtained and a method for detecting CV-A16 neutralizing antibody was established. The results of CV-A16 neutralization antibody detection by this method were in good agreement with those of the traditional CPE method (correlation coefficient r 2 was 0.91g / kg). Conclusion the method of CV-A16 pseudovirus neutralizing antibody can be used as an alternative to CPE method for rapid detection of CV-A16 neutralizing antibody.
【作者單位】： 中國(guó)食品藥品檢定研究院肝炎病毒疫苗室;華蘭生物工程股份有限公司研發(fā)部;
【基金】：國(guó)家科技重大專(zhuān)項(xiàng)(2012ZX10004701)
【分類(lèi)號(hào)】：R392

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本文編號(hào)：1809772