本文選題：P + 過氧化氫酶　； 參考：《中國人獸共患病學(xué)報(bào)》2017年03期

【摘要】：目的構(gòu)建巴西諾卡菌P61基因原核重組表達(dá)載體,在大腸桿菌中表達(dá)具有生物活性的P61蛋白,為P61蛋白的進(jìn)一步相關(guān)研究提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。方法通過基因合成的方法合成P61基因,將其插入到質(zhì)粒pET30a(+)載體并導(dǎo)入BL21大腸桿菌,應(yīng)用IPTG進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)。通過Western Blot對表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行分析。應(yīng)用過氧化氫酶檢測試劑盒檢測其過氧化氫酶活性。結(jié)果 P61蛋白在大腸桿菌中可溶性表達(dá),且具有較高的過氧化氫酶活性,能被感染巴西諾卡菌的小鼠血清識(shí)別。結(jié)論成功構(gòu)建了巴西諾卡菌P61蛋白的原核表達(dá)質(zhì)粒,并能在原核表達(dá)宿主E.coli BL21中進(jìn)行高效表達(dá),且表達(dá)產(chǎn)物具有過氧化氫酶活性。
[Abstract]:Objective to construct the prokaryotic expression vector of P61 gene of Nocardia brasiliensis and express the bioactive P61 protein in Escherichia coli. Methods P61 gene was synthesized by gene synthesis, inserted into plasmid pET30a () vector and introduced into BL21 Escherichia coli. IPTG was used to induce expression. The expressed product was analyzed by Western Blot. The catalase activity was detected by catalase assay kit. Results P61 protein was soluble expressed in Escherichia coli and had high catalase activity, which could be recognized by the sera of mice infected with Nocardia brasiliensis. Conclusion the prokaryotic expression plasmid of P61 protein of Nocardia brasiliensis was successfully constructed, and it was highly expressed in the prokaryotic expression host E.coli BL21, and the expressed product had catalase activity.
【作者單位】： 傳染病預(yù)防控制國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 中國疾病預(yù)防控制中心傳染病預(yù)防控制所;
【基金】：863課題(No.2014AA021404) 國家科技重大專項(xiàng)(No.2013ZXl0004221) 公益性衛(wèi)生行業(yè)專項(xiàng)(No.201302006)聯(lián)合資助~~
【分類號(hào)】：R378

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本文編號(hào)：1806387