本文選題：腫瘤壞死因子α + 間質(zhì)干細(xì)胞��； 參考：《中華損傷與修復(fù)雜志(電子版)》2016年06期

【摘要】：目的 探討100 ng/m L腫瘤壞死因子-α(TNF-α)預(yù)處理人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(h UCMSC)的條件培養(yǎng)基對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)增殖、凋亡的影響。方法 本實驗按隨機數(shù)字表法將HUVEC分為對照組、條件培養(yǎng)基組和預(yù)處理條件培養(yǎng)基組。首先使用含有100 ng/m L TNF-α的內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基刺激HUVEC 12 h后,對照組更換為原培養(yǎng)基,條件培養(yǎng)基組則更換為h UCMSC的條件培養(yǎng)基,以及預(yù)處理條件培養(yǎng)基組更換為TNF-α預(yù)處理h UCMSC的條件培養(yǎng)基。采用MTT法測定HUVEC的增殖活性,流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞的增殖周期,AO-EB染色和流式細(xì)胞儀定性、定量檢測細(xì)胞的凋亡情況。數(shù)據(jù)比較采用重復(fù)測量方差分析。結(jié)果 MTT的檢測結(jié)果提示,在培養(yǎng)24、48、72 h時,對照組細(xì)胞的吸光度值是0.51、0.43、0.32,而條件培養(yǎng)基組和預(yù)處理條件培養(yǎng)基組吸光度值是0.56、0.51、0.45和0.59、0.56、0.52。流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞增殖周期(G2/M+S期)的結(jié)果示:在培養(yǎng)24、48和72 h時,對照組細(xì)胞處于G2/M+S期的比例是(22.34±1.03)%、(10.66±1.07)%、(9.58±0.82)%,而條件培養(yǎng)基組和預(yù)處理條件培養(yǎng)基組處于G2/M+S期的比例則分別是(27.95±1.85)%、(18.59±1.48)%、(13.02±1.91)%和(31.17±1.29)%、(22.44±2.28)%、(16.28±1.11)%,3組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=58.793,P0.05)。此外,流式細(xì)胞儀定性檢測結(jié)果表明:在培養(yǎng)24、48和72 h時,對照組細(xì)胞的凋亡率是(18.95±1.01)%、(16.66±1.51)%、(11.37±1.01)%,而條件培養(yǎng)基組和預(yù)處理條件培養(yǎng)基組細(xì)胞的凋亡率分別是(12.04±1.13)%、(10.88±1.39)%、(6.88±1.63)%和(8.16±1.44)%、(6.97±1.34)%、(2.97±1.44)%,3組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=119.372,P0.05)。AO-EB定性檢測細(xì)胞凋亡的結(jié)果與流式定量檢測的結(jié)果趨勢類似。結(jié)論 TNF-α預(yù)處理h UCMSC的條件培養(yǎng)基可發(fā)揮顯著促進(jìn)HUVEC的增殖和抑制HUVEC凋亡的作用。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of human umbilical cord mesenchymal stem cells pretreated with 100 ng/m L tumor necrosis factor- 偽 (TNF- 偽) on the proliferation and apoptosis of human umbilical vein endothelial cells (HUVECs). Methods HUVEC was randomly divided into three groups: control group, conditioned medium group and pretreatment conditioned medium group. At first, the endothelial cell medium containing 100 ng/m L TNF- 偽 was used to stimulate HUVEC for 12 h, then the control group was replaced by the original medium, and the conditioned medium group was replaced by the conditional medium of h UCMSC. The condition medium was replaced by TNF- 偽 pretreatment medium for h UCMSC. The proliferative activity of HUVEC was measured by MTT assay, AO-EB staining by flow cytometry and qualitative analysis by flow cytometry, and apoptosis was detected quantitatively. The data were compared by repeated measurement ANOVA. Results the results of MTT showed that the absorbance value of the control group was 0.51 ~ 0.43 ~ 0.32, while that of the conditioned medium group and the pretreatment medium group was 0.566 ~ 0.51 ~ 0.45 and 0.599 ~ 0.56 ~ 0.62 respectively. Flow cytometry was used to detect the G _ 2 / M _ S phase of cell proliferation cycle. The percentage of cells in G _ 2 / M _ S phase in the control group was 22.34 鹵1.03 and 10.66 鹵1.07 鹵9.58 鹵0.82, respectively, while that in the conditioned medium group and the conditioned medium group was 27.95 鹵1.855.It was 18.59 鹵1.4813.02 鹵1.91g% and 22.44 鹵2.287.28 鹵1.117m respectively in the conditioned medium group and in the conditioned medium group. There was significant difference between the two groups. In addition, the qualitative results of flow cytometry showed that: at 24 h and 72 h of culture, The apoptosis rate of the control group was 16.66 鹵1.51, while that of the conditioned medium group and the conditioned medium group was 12.04 鹵1.13 + 1.39 鹵6.88 鹵1.63% and 8.16 鹵1.44 鹵6.97 鹵1.44 respectively. There were significant differences between the three groups: F119.372P0.05N. AO-EB and F119.372P0.05N. The trend is similar. Conclusion the conditioned medium pretreated with TNF- 偽 for h UCMSC can significantly promote the proliferation of HUVEC and inhibit the apoptosis of HUVEC.
【作者單位】： 內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué);內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)第三附屬醫(yī)院燒傷科內(nèi)蒙古燒傷研究所;

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本文編號：1790531