SD大鼠背根神經節(jié)細胞新取材和培養(yǎng)方法
發(fā)布時間:2018-04-19 18:13
本文選題:背根神經結 + 細胞培養(yǎng); 參考:《華中科技大學》2011年碩士論文
【摘要】:【目的】:探討有效摘取SD大鼠背根神經結(DRG)的方法,為實驗取材奠定基礎。方法①取材選擇為三周SD大鼠,提取DRG神經元。用顯微解剖獲取足夠數量的SD大鼠背根神經結,通過胰蛋白酶+Ⅳ型膠原酶消化②分離:PBS洗滌吸干液體,加入0.2%Ⅳ型膠原酶和0.25%胰蛋白酶放入37℃溫箱邊消化邊用眼科剪剪碎背根神經結重復數次,直到消化液變得粘稠后就可以用滴管吹打,吹打后就可以完全的把背根組織徹底的消化掉,加入含有血清的NBL培養(yǎng)基終止消化,用1000轉離心,③原代培養(yǎng)將細胞懸液加入底面鋪有L一多聚賴氨酸的培養(yǎng)皿(PP )中,放人37℃、體積分數為0.05的CO_2培養(yǎng)箱中,讓其自然貼壁。定期在倒置相差顯微鏡下觀察。 【結果】背根神經結細胞原代貼壁生長較慢,一個月以后才能長滿瓶底生長二天后20倍光鏡下背根神經結細胞。細胞成簇生長,向四周放射狀排列,細胞核圓形透亮,細胞形態(tài)多邊型,向四周伸出較長的觸須,其他類型細胞基本上已經死掉而懸浮在培養(yǎng)基里。
[Abstract]:Objective: to explore the method of effective extraction of DRG in dorsal root ganglion of SD rats, and to lay a foundation for the experiment.Methods 1 DRG neurons were extracted from three week SD rats.A sufficient number of dorsal root knots of SD rats were obtained by microdissection and purified by trypsin type 鈪,
本文編號:1774174
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