發(fā)布時(shí)間：2018-04-17 05:14

  本文選題：約氏瘧原蟲 + 樹突狀細(xì)胞　； 參考：《中國寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志》2017年01期

【摘要】：目的探討約氏瘧原蟲(Plasmodium yoelii)17XL株(Py17XL)感染小鼠過程中樹突狀細(xì)胞(DCs)對(duì)輔助性T細(xì)胞17型(Thl7)細(xì)胞分化和功能的調(diào)控作用及機(jī)制。方法將12只雌性BALB/c小鼠隨機(jī)分為感染組(Py17XL)、Toll樣受體4(TLR4)阻斷組(Py17XL+TLR4)、Toll樣受體9(TLR9)阻斷組(Py17XL+TLR9)和TLR4聯(lián)合TLR9阻斷組(Py17XL+TLR4+TLR9),每組3只。感染前1 d,腹腔注射10μg抗-TLR4單抗(TLR4阻斷組)或50μg抗-TLR9單抗(TLR9阻斷組)阻斷DCs的功能,注射體積為0.4 ml,對(duì)照組注射等量的PBS。4組小鼠均腹腔注射1×10~6 Py17XL感染的紅細(xì)胞。感染后第0、3和5天計(jì)數(shù)紅細(xì)胞感染率,同時(shí)制備脾細(xì)胞懸液,流式細(xì)胞儀檢測脾臟細(xì)胞中CD11c+TLR9+和Th17細(xì)胞數(shù)量變化,ELISA檢測脾細(xì)胞培養(yǎng)上清中干擾素-γ(IFN-γ)和白細(xì)胞介素-10(IL-10)水平的變化。結(jié)果流式細(xì)胞儀檢測表明,DCs阻斷模型構(gòu)建成功。感染后第5天,感染組、TLR4阻斷組、TLR9阻斷組和TLR4聯(lián)合TLR9阻斷組小鼠原蟲血癥分別為28.0%、29.0%、31.0%和16.3%;感染后第7天,原蟲血癥分別為43.3%、47.5%、32.5%和8.0%,感染組和TLR4阻斷組小鼠全部死亡,其余阻斷組小鼠于感染后第6天開始出現(xiàn)死亡。與感染組比較,TLR9阻斷組和TLR4聯(lián)合TLR9阻斷組小鼠原蟲血癥上升緩慢,生存期明顯延長至11 d和15 d。流式細(xì)胞儀檢測結(jié)果顯示:感染后第5天,TLR9阻斷組和TLR4聯(lián)合TLR9阻斷組Th17細(xì)胞數(shù)量分別為1.2%和1.4%,與感染組(1.9%)相比,數(shù)量明顯減少(P0.05,P0.01)。ELISA檢測結(jié)果顯示:感染后第5天,TLR4聯(lián)合TLR9阻斷組小鼠IFN-γ和IL-10水平分別為(232.4±15.5)pg/ml和(1 791.2±58.2)pg/ml,與感染組[(90.7±50.1)pg/ml和(962.6±409.0)pg/ml]相比,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05,P0.01)。結(jié)論 Py17XL感染小鼠過程中DCs調(diào)控了Thl7細(xì)胞的分化和功能。DCs阻斷(Py17XL+TLR4+TLR9)后,感染小鼠原蟲血癥降低,生存期延長。
[Abstract]:Objective to investigate the effect and mechanism of dendritic cells (DCs) on the differentiation and function of helper T cell type 17 (Thl7) cells in mice infected with Plasmodium yoelii)17XL strain Py17 XLL.Methods Twelve female BALB/c mice were randomly divided into infected group (Py17XL TLR4) and TLR4 combined with TLR9 (3 mice in each group).One day before infection, 10 渭 g anti-TLR4 monoclonal antibody (10 渭 g TLR4) or 50 渭 g anti-TLR9 monoclonal antibody (50 渭 g anti-TLR9) blocked the function of DCs. The volume of PBS.4 was 0.4 ml. In control group, the same amount of PBS.4 mice were injected intraperitoneally with red blood cells infected with 1 脳 10 6 Py17XL.The infection rate of erythrocyte was counted on the 3rd and 5th day after infection, and spleen cell suspension was prepared. The changes of CD11c TLR9 and Th17 cells in spleen cell were detected by flow cytometry. The levels of IFN- 緯 and IL-10 in the supernatant of spleen cell culture were detected by Elisa.Results flow cytometry showed that the blocking model of DCs was successfully constructed.On the 5th day after infection, the protozoaemia of the infected mice in the TLR9 blocking group and the TLR4 combined TLR9 blocking group were 28.00.29.0% and 16.30.On the 7th day after infection, the rates of protozoemia were 43.33.5% and 8.0%, respectively. All the mice in the infection group and TLR4 block group died.The rest of the mice in the blocking group began to die on the 6th day after infection.Compared with the infected group, the parasitemia of mice in the TLR9 group and the TLR4 combined with TLR9 group increased slowly, and the survival time was prolonged to 11 days and 15 days.The results of flow cytometry showed that the number of Th17 cells in the TLR9 blocking group and the TLR4 combined TLR9 blocking group were 1.2% and 1.4 on the 5th day after infection, respectively, compared with that in the infected group (1.9%).The results of Elisa showed that the levels of IFN- 緯 and IL-10 were 232.4 鹵15.5)pg/ml and 1 791.2 鹵58.2 渭 g / ml in the TLR4 + TLR9 group on the 5th day after infection, which were significantly different from those in the infected group [90.7 鹵50.1)pg/ml and 962.6 鹵409.0)pg/ml].Conclusion during the course of Py17XL infection, DCs regulates the differentiation and function of Thl7 cells. After blocking Py17XL TLR4 TLR9, the parasitemia of infected mice decreases and the survival time is prolonged.
【作者單位】： 佳木斯大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院;佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院;
【基金】：黑龍江省教育廳海外學(xué)人資助項(xiàng)目(No.1254HQ017)~~
【分類號(hào)】：R382.31

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本文編號(hào)：1762224