不同方法誘導(dǎo)THP-1細(xì)胞分化效果比較
本文選題:THP- + 佛波酯。 參考:《中國比較醫(yī)學(xué)雜志》2017年09期
【摘要】:目的優(yōu)化不同方法刺激THP-1細(xì)胞定向分化為M1、M2巨噬細(xì)胞及DC細(xì)胞,為M1、M2和DC三種體外細(xì)胞模型研究奠定基礎(chǔ)。方法首先用PMA和GM-CSF/M-CSF兩種方法刺激誘導(dǎo)THP-1細(xì)胞分化,再分別添加不同細(xì)胞因子誘導(dǎo)其分化為M1、M2和DC細(xì)胞,觀察細(xì)胞形態(tài)的變化,并用流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞表面分子的表達(dá)情況。結(jié)果兩種方法刺激細(xì)胞CD分子表達(dá)的整體趨勢基本一致。THP-1-M1細(xì)胞表面CD80和CD86表達(dá)量顯著增加;THP-1-M2細(xì)胞高表達(dá)CD163和CD209;THP-1-DC細(xì)胞CD14表達(dá)量顯著降低,高表達(dá)CD80、CD86和CD11c。PMA刺激后,M1、M2和DC細(xì)胞均貼壁生長;GM-CSF/M-CSF刺激后,只有DC細(xì)胞部分貼壁生長,M1和M2細(xì)胞仍呈懸浮生長。結(jié)論兩種方法均能成功地誘導(dǎo)THP-1細(xì)胞向不同細(xì)胞亞型分化,但是誘導(dǎo)出來的細(xì)胞在形態(tài)上存在一定差異,可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇刺激方法。
[Abstract]:Objective to optimize different methods to stimulate THP-1 cells to differentiate into M _ 1M _ 2 macrophages and DC cells, and to lay a foundation for the study of M _ 1M _ 2 and DC cell models in vitro.Methods at first, PMA and GM-CSF/M-CSF were used to stimulate the differentiation of THP-1 cells, and then different cytokines were added to induce the differentiation into M1M 2 and DC cells respectively. The morphological changes of the cells were observed and the expression of cell surface molecules was detected by flow cytometry.Results the expression of CD80 and CD86 on the surface of THP-1-M1 cells were significantly increased by the two methods. The expression of CD163 in THP-1-M2 cells and the expression of CD14 in THP-1-M2 cells decreased significantly.Overexpression of CD80, CD86 and CD11c.PMA stimulated M1M1M 2 and DC cells both adherent growth and GM-CSF / M-CSF stimulation, only partial adherent growth of DC cells, M 1 and M 2 cells, still showed suspension growth.Conclusion both methods can successfully induce the differentiation of THP-1 cells into different cell subtypes, but there are some differences in morphology of the induced cells, so we can choose the stimulation method according to the experimental demand.
【作者單位】: 北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院比較醫(yī)學(xué)中心中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動物研究所衛(wèi)生部人類疾病比較醫(yī)學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室國家中醫(yī)藥管理局人類疾病動物模型三級實(shí)驗(yàn)室新發(fā)再發(fā)傳染病動物模型研究北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】:國家自然科學(xué)基金青年科學(xué)基金項(xiàng)目(編號:81301437) 科技部重大專項(xiàng)(編號:2014ZX10001001-001-004,2014ZX10001001-002-006)
【分類號】:R392
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,本文編號:1738581
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