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氯通道阻斷劑對一氧化氮誘導(dǎo)培養(yǎng)大鼠海馬神經(jīng)元凋亡的影響

發(fā)布時(shí)間:2018-04-10 03:20

  本文選題:多聚腺苷核糖聚合酶-1 切入點(diǎn):3-嗎啉斯德酮亞胺 出處:《遵義醫(yī)學(xué)院》2011年碩士論文


【摘要】:目的:探討氯通道阻斷劑(DIDS)對一氧化氮(NO)供體SIN-1誘導(dǎo)大鼠海馬神經(jīng)元凋亡及其PARP-1和AIF蛋白表達(dá)的影響。 方法:采用培養(yǎng)12天的SD大鼠海馬神經(jīng)元,在確定SIN-1和DIDS的最佳使用濃度后,分為control組、SIN-1組、SIN-1+DIDS組,其中藥品作用時(shí)間是18小時(shí),采用MTT法檢測細(xì)胞存活率、Hoechst33258熒光染色檢測細(xì)胞凋亡、細(xì)胞免疫熒光染色和Western blot檢測相關(guān)蛋白PARP-1與AIF的表達(dá)。 結(jié)果:(1)SIN-1誘導(dǎo)神經(jīng)元凋亡具有濃度依賴性,1.0mmol/L的SIN-1可顯著誘導(dǎo)神經(jīng)元發(fā)生死亡。(2)氯通道阻斷劑DIDS能明顯提高細(xì)胞生存率,抑制SIN-1誘導(dǎo)培養(yǎng)海馬神經(jīng)元凋亡的毒性作用。(3)SIN-1誘導(dǎo)神經(jīng)元凋亡后可以引起PARP-1與AIF蛋白表達(dá)增強(qiáng)。(4)氯通道阻斷劑DIDS可以明顯降低SIN-1誘導(dǎo)的海馬神經(jīng)元凋亡過程中的PARP-1和AIF的增加。 結(jié)論:氯通道阻斷劑DIDS可能通過影響PARP-1/AIF非caspase依賴凋亡途徑而對損傷神經(jīng)元進(jìn)行保護(hù)。
[Abstract]:Aim: to investigate the effects of chloride channel blocker (DIDS) on the apoptosis of hippocampal neurons and the expression of PARP-1 and AIF protein in hippocampal neurons of rats induced by nitric oxide (no) donor SIN-1.Methods: the hippocampal neurons of SD rats were cultured for 12 days. After determining the optimal concentration of SIN-1 and DIDS, they were divided into control group (SIN-1 group) and SIN-1 group (SIN-1 DIDS group).MTT assay was used to detect cell viability and Hoechst33258 fluorescence staining was used to detect cell apoptosis. Cellular immunofluorescence staining and Western blot were used to detect the expression of PARP-1 and AIF.Results SIN-1 (1.0 mmol / L) induced neuronal apoptosis in a concentration-dependent manner could significantly induce neuronal death. DIDS, a chloride channel blocker, could significantly improve the cell survival rate.Inhibition of apoptosis of cultured hippocampal neurons induced by SIN-1. After inducing apoptosis of hippocampal neurons induced by SIN-1, DIDS could significantly reduce the increase of PARP-1 and AIF in the apoptosis process of hippocampal neurons induced by SIN-1, which could induce the increased expression of PARP-1 and AIF protein. DIDS, a chloride channel blocker, could significantly reduce the increase of PARP-1 and AIF in the process of apoptosis of hippocampal neurons induced by SIN-1.Conclusion: DIDS, a chloride channel blocker, may protect injured neurons by influencing PARP-1/AIF non-#en2# dependent apoptosis pathway.
【學(xué)位授予單位】:遵義醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2011
【分類號(hào)】:R363

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本文編號(hào):1729440

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