本文選題：間充質(zhì)干細(xì)胞　切入點(diǎn)：神經(jīng)誘導(dǎo)分化　出處：《第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報》2016年19期

【摘要】：目的明確骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells,MSCs)成神經(jīng)分化對細(xì)胞內(nèi)鐵蛋白重鏈(ferritin heavy chain 1,FTH1)基因表達(dá)的影響,探討FTH1報告基因成像檢測定向分化細(xì)胞的可行性。方法以慢病毒為載體將FTH1基因轉(zhuǎn)入MSCs中,利用全反式維甲酸和神經(jīng)細(xì)胞誘導(dǎo)液對其誘導(dǎo)分化,Western blot檢測分化前后細(xì)胞內(nèi)FTH1的表達(dá),MRI觀察細(xì)胞T2WI信號變化,普魯士藍(lán)染色和透射電鏡檢測細(xì)胞內(nèi)FTH1表達(dá)所引起的聚鐵效應(yīng)。結(jié)果攜帶FTH1基因的MSCs(MSCs-FTH1)成功分化為神經(jīng)元樣細(xì)胞(Neurons-FTH1)。Western blot檢測顯示MSCs-FTH1及Neurons-FTH1細(xì)胞中FTH1均明顯表達(dá);在500μmol/L枸櫞酸鐵銨的培養(yǎng)條件下,兩種細(xì)胞MRI檢查均發(fā)現(xiàn)T2WI信號明顯降低;普魯士藍(lán)染色和透射電鏡證實(shí)細(xì)胞內(nèi)較多鐵顆粒聚集。結(jié)論 MSCs成神經(jīng)分化對細(xì)胞內(nèi)FTH1基因的表達(dá)無明顯影響,基于FTH1的MRI報告基因成像可用于MSCs神經(jīng)分化后的檢測。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of mesenchymal stem cells (MSCs) neural differentiation on the expression of ferritin heavy chain 1 (FTH1) gene in bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs), and to explore the feasibility of FTH1 reporter gene imaging for the detection of differentiated cells.Methods the FTH1 gene was transfected into MSCs with lentivirus vector. The expression of FTH1 in the cells before and after differentiation was detected by using all-trans retinoic acid (ATRA) and neuronal inducer to detect the expression of FTH1 in the cells before and after differentiation. The changes of T2WI signal were observed.Prussian blue staining and transmission electron microscopy (TEM) were used to detect the polyferric effect induced by FTH1 expression.Results the expression of FTH1 in MSCs-FTH1 and Neurons-FTH1 cells was detected by Western blot. The results showed that the expression of FTH1 in both MSCs-FTH1 and Neurons-FTH1 cells was significantly lower than that in cultured cells with 500 渭 mol/L ammonium citrate, and the T2WI signal was significantly decreased by MRI examination of the two cells under the condition of culture of 500 渭 mol/L ammonium citrate, and the results of MRI analysis showed that the expression of FTH1 in both cells was significantly lower than that in the control group (P < 0.05).Prussian blue staining and transmission electron microscopy (TEM) showed that more iron particles were accumulated in the cells.Conclusion MSCs neural differentiation has no significant effect on the expression of FTH1 gene in cells. MRI reporter gene imaging based on FTH1 can be used for the detection of MSCs neural differentiation.
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院放射科;兒童發(fā)育疾病研究省部共建教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室兒科學(xué)重慶市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室重慶市兒童發(fā)育重大疾病診治與預(yù)防國際科技合作基地;
【基金】：國家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(81171387)~~
【分類號】：R329.2

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本文編號：1719416