本文選題：表皮生長因子　切入點：間質(zhì)干細胞　出處：《中國組織工程研究》2017年29期

【摘要】：背景:表皮生長因子作為一種輔助生長因子,但是對于骨髓間充質(zhì)干細胞的生長是否必須尚無定論。目的:建立大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞分離提取以及鑒定的方法,同時探索表皮生長因子對其增殖能力以及遷移能力的影響,同時探索其潛在機制。方法:①采用全骨髓貼壁法,分離純化大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞,培養(yǎng)至第3代,使用流式細胞儀檢測細胞表面抗原CD29,CD45,CD90表達情況。通過成骨和成脂分化誘導,更進一步鑒定骨髓間充質(zhì)干細胞;②同時通過CCK-8法和克隆形成實驗測量表皮生長因子對骨髓間充質(zhì)干細胞的第3代細胞的增殖能力的影響。同時通過Transwell小室驗證表皮生長因子對骨髓間充質(zhì)干細胞的第3代細胞遷移能力的影響。通過蛋白印跡實驗檢測PI3K/Akt和核因子κB信號通路相關蛋白表達水平,探索表皮生長因子的作用機制。結(jié)果與結(jié)論:①原代骨髓間充質(zhì)干細胞呈多角形和梭形,隨著培養(yǎng)時間增加,逐漸呈梭形為主。流式細胞術(shù)檢測第3代細胞表面CD29,CD90表達呈陽性,CD45表達成陰性。并且對骨髓間充質(zhì)干細胞的第3代細胞成功進行了成骨和成脂分化誘導;②表皮生長因子能夠促進第3代細胞的增殖,且細胞中PI3K/Akt信號通路關鍵分子p-Akt表達水平的增加,同時其下游信號分子Bax表達水平降低而Bcl-2表達升高。表皮生長因子能夠通過調(diào)節(jié)核因子κB信號通路分子p 65以及IκB的磷酸化水平,同時也增加了基質(zhì)金屬蛋白酶9的表達水平,從而促進大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞的遷移;③結(jié)果表明表皮生長因子促進骨髓間充質(zhì)干細胞的增殖和遷移。
[Abstract]:Background: epidermal growth factor (EGF) is an auxiliary growth factor, but it is not clear whether the growth of bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) must be done.Aim: to establish a method for isolation, extraction and identification of rat bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs), and to explore the effects of EGF on its proliferation and migration, as well as its potential mechanism.Methods the bone marrow mesenchymal stem cells of rats were isolated and purified by whole bone marrow adherent method, and cultured to the third passage. The expression of CD29, CD45, CD90 was detected by flow cytometry.The effects of epidermal growth factor on the proliferation of bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) were measured by CCK-8 assay and clone formation assay.The effects of epidermal growth factor (EGF) on the migration ability of the third generation of bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) were also tested by Transwell chamber.To investigate the mechanism of epidermal growth factor (EGF), PI3K/Akt and NF- 魏 B signaling pathway related proteins were detected by Western blotting.Results and conclusion the primary bone marrow mesenchymal stem cells were polygonal and fusiform.Flow cytometry was used to detect the positive expression of CD29 + CD90 and negative expression of CD45 on the surface of the third passage cells.Furthermore, osteogenic and adipogenic differentiation induced by EGF 2 in the third passage of bone marrow mesenchymal stem cells could promote the proliferation of the third passage cells, and the expression of p-Akt, a key molecule of the PI3K/Akt signaling pathway, was increased in the cells.At the same time, its downstream signal molecule Bax expression level decreased, but the Bcl-2 expression increased.Epidermal growth factor can promote the migration of rat bone marrow mesenchymal stem cells by regulating the phosphorylation level of nuclear factor- 魏 B signaling pathway p65 and I 魏 B and increasing the expression of matrix metalloproteinase-9.The results showed that epidermal growth factor promoted the proliferation and migration of bone marrow mesenchymal stem cells.
【作者單位】： 遵義醫(yī)學院生物化學與分子生物學教研室;遵義醫(yī)學院附屬醫(yī)院胸外科;遵義醫(yī)學院附屬醫(yī)院耳鼻喉科;
【基金】：貴州省科學技術(shù)基金(黔科合J字[2012]2360號)~~
【分類號】：R329.2

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