RSK4基因表達(dá)及其對U87細(xì)胞增殖的影響
本文選題:RSK基因 切入點(diǎn):真核表達(dá) 出處:《中國神經(jīng)腫瘤雜志》2011年02期
【摘要】:背景與目的:RSK4是非生長因子依賴的絲/蘇氨酸蛋白激酶,參與多種信號通路。本研究構(gòu)建了人RSK4基因的真核表達(dá)系統(tǒng),研究其對膠質(zhì)瘤的調(diào)控作用,為闡明RSK4功能奠定基礎(chǔ)。方法:采用RT-PCR法從人正常乳腺上皮細(xì)胞MCF-10A細(xì)胞中擴(kuò)增獲得RSK4基因的編碼區(qū),定向克隆到真核表達(dá)載體pcDNA3.1(-)上,構(gòu)建真核表達(dá)載體pcDNA3.1(-)/RSK4。脂質(zhì)體法介導(dǎo)pcDNA3.1(-)/RSK4質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至U87細(xì)胞中,RT-PCR和Western blot檢測表達(dá)情況。采用MTT法檢測RSK4基因?qū)87細(xì)胞生長的影響。結(jié)果:轉(zhuǎn)染pcDNA3.1(-)/RSK4組U87細(xì)胞增殖明顯被抑制(P0.05)。結(jié)論:RSK4可以抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖。
[Abstract]:Background & AIM: RSK4 is a non-growth factor-dependent silk / threonine protein kinase involved in a variety of signaling pathways. In this study, a eukaryotic expression system of human RSK4 gene was constructed to study its role in glioma regulation. Methods: the coding region of RSK4 gene was amplified by RT-PCR from MCF-10A cells of human normal mammary epithelial cells and cloned into eukaryotic expression vector pcDNA3.1 ~ (-1). The eukaryotic expression vector pcDNA3.1 / RSK4 was constructed. PcDNA3.1(-)/RSK4 plasmid was transfected into U87 cells by liposome method. RT-PCR and Western blot were used to detect the expression of RSK4 gene in U87 cells. The effect of RSK4 gene on the growth of U87 cells was detected by MTT assay. Results: the proliferation of U87 cells in the transfected pcDNA3.1(-)/RSK4 group was significantly detected by RT-PCR and Western blot. Conclusion: 1. RSK4 can inhibit the proliferation of glioma cells.
【作者單位】: 中國科學(xué)院海洋研究所生物開放室329室;中國科學(xué)院研究生院;
【分類號】:R739.41
【參考文獻(xiàn)】
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【共引文獻(xiàn)】
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