下調(diào)Cyclophilin A對(duì)喉鱗癌裸鼠移植瘤模型腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的影響
本文選題:CypA 切入點(diǎn):慢病毒 出處:《第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)》2017年04期
【摘要】:目的通過RNA干擾技術(shù),研究親環(huán)蛋白A(Cyclophilin A,CypA)基因?qū)眵[癌裸鼠移植瘤模型在腫瘤生長(zhǎng)和腫瘤轉(zhuǎn)移方面的影響。方法構(gòu)建沉默CypA基因慢病毒顆粒,轉(zhuǎn)染Hep2喉癌細(xì)胞,將15只裸鼠完全隨機(jī)分為3組,分別為空白對(duì)照組、陰性對(duì)照組、基因沉默組,每組5只,建立喉鱗癌裸鼠移植瘤轉(zhuǎn)移模型,觀察腫瘤生長(zhǎng)情況及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況。PV二步法免疫組化檢測(cè)CypA、細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子(EMMPRIN、CD147)、細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)在腫瘤組織的表達(dá),RT-PCR檢測(cè)CypA、CD147、MMP-9 m RNA的表達(dá)水平,Western blot法檢測(cè)CypA、CD147、MMP-9蛋白的表達(dá)水平。結(jié)果基因沉默組腫瘤體積較空白對(duì)照組、陰性對(duì)照組小,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);免疫組化觀察腫瘤為中分化鱗狀細(xì)胞癌,CypA主要表達(dá)在細(xì)胞質(zhì),CD147主要表達(dá)在細(xì)胞膜,MMP-9主要表達(dá)在腫瘤間質(zhì);在m RNA水平和蛋白水平基因沉默組CypA、CD147、MMP-9的表達(dá)都明顯降低(P0.05)。結(jié)論下調(diào)CypA可以通過調(diào)節(jié)CD147、MMP-9的表達(dá)水平抑制喉癌的生長(zhǎng),延緩腫瘤轉(zhuǎn)移。
[Abstract]:Objective to study the effect of cyclin A(Cyclophilin Agna) gene on tumor growth and metastasis in nude mice with laryngeal squamous cell carcinoma (SCC) by RNA interference technique. Methods Lentivirus particles of silencing CypA gene were constructed and transfected into Hep2 laryngeal carcinoma cells. Fifteen nude mice were randomly divided into three groups: blank control group, negative control group and gene silencing group. The expression of CypA, EMMPRIN-CD147, and MMP-9 in tumor tissues was detected by RT-PCR. The expression of CypA, EMMPRIN-CD147 and MMP-9 was detected by RT-PCR. The expression of CypA1CD147 and MMP-9 m in tumor tissues was detected by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR). The expression of MMP-9 m in tumor tissues was detected by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR). The expression of MMP-9 protein was detected by Western blot. Results the tumor volume in the gene silencing group was higher than that in the blank control group. In the negative control group, the difference was statistically significant (P 0.05), and the expression of CypA was mainly expressed in the cytoplasm, CD147, and the expression of MMP-9 was mainly expressed in the stroma. The expression of MMP-9 in CypAfir CD147m9 was significantly decreased in the group of gene silencing of m RNA level and protein level. Conclusion down-regulation of CypA can inhibit the growth of laryngeal carcinoma and delay the metastasis of laryngeal carcinoma by regulating the expression level of CD147 MMP 9.
【作者單位】: 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院耳鼻咽喉科;
【基金】:國(guó)家臨床重點(diǎn)?平ㄔO(shè)項(xiàng)目(衛(wèi)辦醫(yī)政函[2012]649號(hào)) 重慶市衛(wèi)生局醫(yī)學(xué)科研重點(diǎn)項(xiàng)目(20121024)~~
【分類號(hào)】:R739.65;R-332
【參考文獻(xiàn)】
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【共引文獻(xiàn)】
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,本文編號(hào):1668097
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