肺炎鏈球菌不同生長(zhǎng)時(shí)間自溶素lytA基因表達(dá)的差異性分析
本文選題:肺炎鏈球菌 切入點(diǎn):實(shí)時(shí)熒光定量PCR 出處:《中國(guó)病原生物學(xué)雜志》2017年05期 論文類(lèi)型:期刊論文
【摘要】:目的探討肺炎鏈球菌lytA基因在細(xì)菌生長(zhǎng)的不同時(shí)間點(diǎn)的表達(dá)差異。方法根據(jù)GenBank中肺炎鏈球菌M66株的lytA基因序列(FN 549899.1)設(shè)計(jì)并合成引物,選取17個(gè)生長(zhǎng)時(shí)間點(diǎn),分別提取肺炎鏈球菌的總RNA,采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)(QRT-PCR)檢測(cè)lytA基因在不同生長(zhǎng)時(shí)間點(diǎn)的相對(duì)表達(dá)量,利用溶解曲線觀察擴(kuò)增反應(yīng)特異性,采用雙標(biāo)準(zhǔn)曲線法進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。結(jié)果經(jīng)過(guò)內(nèi)參基因16SRNA校正后,肺炎鏈球菌lytA基因相對(duì)表達(dá)量從生長(zhǎng)的18h-96h呈現(xiàn)逐漸升高的趨勢(shì),96h時(shí)達(dá)到高峰,與其他時(shí)間點(diǎn)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。之后開(kāi)始下降,144h生長(zhǎng)點(diǎn)出現(xiàn)第二次升高趨勢(shì)。結(jié)論不同生長(zhǎng)時(shí)間點(diǎn)肺炎鏈球菌lytA基因表達(dá)量存在差異,與細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)菌落表現(xiàn)的自溶現(xiàn)象相關(guān),為進(jìn)一步研究lytA基因與肺炎鏈球菌自溶現(xiàn)象的相關(guān)性奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:Objective to investigate the expression of lytA gene in Streptococcus pneumoniae at different time points. Methods primers were designed and synthesized according to the lytA gene sequence of Streptococcus pneumoniae M66 strain M66 in GenBank, and 17 growth time points were selected. The total RNAs of Streptococcus pneumoniae were extracted, and the relative expression of lytA gene at different growth time points was detected by real-time fluorescence quantitative PCR technique. The specificity of amplification reaction was observed by dissolution curve. Results the relative expression of lytA gene of Streptococcus pneumoniae reached its peak from 18h-96h to 96h after 16SRNA correction. Compared with other time points, the difference was statistically significant (P 0.05). After that, the growth point of Streptococcus pneumoniae increased for a second time. Conclusion there are differences in the expression of lytA gene in Streptococcus pneumoniae at different growth time points. This study was related to the autolysis of bacterial colony, which laid a foundation for the further study of the correlation between lytA gene and the autolytic phenomenon of Streptococcus pneumoniae.
【作者單位】: 四川省綿陽(yáng)市中心醫(yī)院;大連醫(yī)科大學(xué)臨床免疫與微生物教研室;
【基金】:四川省衛(wèi)計(jì)委科技基金資助項(xiàng)目(No.16PJ188)
【分類(lèi)號(hào)】:R378
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,本文編號(hào):1636082
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