肺炎鏈球菌不同生長時間自溶素lytA基因表達的差異性分析
本文選題:肺炎鏈球菌 切入點:實時熒光定量PCR 出處:《中國病原生物學雜志》2017年05期 論文類型:期刊論文
【摘要】:目的探討肺炎鏈球菌lytA基因在細菌生長的不同時間點的表達差異。方法根據(jù)GenBank中肺炎鏈球菌M66株的lytA基因序列(FN 549899.1)設(shè)計并合成引物,選取17個生長時間點,分別提取肺炎鏈球菌的總RNA,采用實時熒光定量PCR技術(shù)(QRT-PCR)檢測lytA基因在不同生長時間點的相對表達量,利用溶解曲線觀察擴增反應(yīng)特異性,采用雙標準曲線法進行數(shù)據(jù)分析。結(jié)果經(jīng)過內(nèi)參基因16SRNA校正后,肺炎鏈球菌lytA基因相對表達量從生長的18h-96h呈現(xiàn)逐漸升高的趨勢,96h時達到高峰,與其他時間點比較差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。之后開始下降,144h生長點出現(xiàn)第二次升高趨勢。結(jié)論不同生長時間點肺炎鏈球菌lytA基因表達量存在差異,與細菌培養(yǎng)時菌落表現(xiàn)的自溶現(xiàn)象相關(guān),為進一步研究lytA基因與肺炎鏈球菌自溶現(xiàn)象的相關(guān)性奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:Objective to investigate the expression of lytA gene in Streptococcus pneumoniae at different time points. Methods primers were designed and synthesized according to the lytA gene sequence of Streptococcus pneumoniae M66 strain M66 in GenBank, and 17 growth time points were selected. The total RNAs of Streptococcus pneumoniae were extracted, and the relative expression of lytA gene at different growth time points was detected by real-time fluorescence quantitative PCR technique. The specificity of amplification reaction was observed by dissolution curve. Results the relative expression of lytA gene of Streptococcus pneumoniae reached its peak from 18h-96h to 96h after 16SRNA correction. Compared with other time points, the difference was statistically significant (P 0.05). After that, the growth point of Streptococcus pneumoniae increased for a second time. Conclusion there are differences in the expression of lytA gene in Streptococcus pneumoniae at different growth time points. This study was related to the autolysis of bacterial colony, which laid a foundation for the further study of the correlation between lytA gene and the autolytic phenomenon of Streptococcus pneumoniae.
【作者單位】: 四川省綿陽市中心醫(yī)院;大連醫(yī)科大學臨床免疫與微生物教研室;
【基金】:四川省衛(wèi)計委科技基金資助項目(No.16PJ188)
【分類號】:R378
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