本文選題：布魯菌　切入點：原核表達　出處：《揚州大學學報(農(nóng)業(yè)與生命科學版)》2017年02期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：PCR擴增布魯菌rplL、groEL、bp26、omp25、p39、sod1基因,構(gòu)建pET-28a(+)-rplL、pCold I-groEL、pCold I-bp26、pCold I-omp25、pCold I-p39、pCold I-sod1原核表達質(zhì)粒,分別轉(zhuǎn)化大腸埃希菌BL21(DE3)感受態(tài)細胞,經(jīng)IPTG誘導后,SDS-PAGE和Western blot分析蛋白的表達情況,免疫親和純化目的蛋白。結(jié)果表明:PCR分別擴增出375、1 641、753、642、1 206和522bp的目的片段,重組菌誘導后分別表達大小為20、65、33、28、47和24ku的重組蛋白,與目的蛋白理論大小相符。Western blot結(jié)果顯示6種重組蛋白均能與His單抗發(fā)生特異性反應,表明6種重組蛋白具有良好的免疫反應性,為進一步深入研究奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:The pET-28a (pET-28a) pET-28a was amplified by PCR. The prokaryotic expression plasmid of pET-28a was constructed by SDS-PAGE and Western blot analysis, and the expression of pET-28a was analyzed by SDS-PAGE and Western blot analysis after SDS-PAGE and Western blot were used to analyze the expression of pET-28a, and the expression of the protein was analyzed by SDS-PAGE and Western blot, respectively, and the expression of pET-28a was analyzed by SDS-PAGE and Western blot, respectively, and the expression of pET-28a was analyzed by SDS-PAGE and Western blot, respectively. The expression of pET-28a was analyzed by SDS-PAGE and Western blot. The purified target protein was purified by immuno-affinity assay. The results showed that the target fragments of 375U 1 641C 753N 642N 1 206 and 522bp were amplified by PCR, respectively, and the recombinant proteins were expressed at the size of 20x65m3328447 and 24ku, respectively, after induction by the recombinant bacteria. The results of Western blot showed that the six recombinant proteins could react specifically with His McAbs, indicating that the six recombinant proteins had good immunoreactivity, which laid a foundation for further study.
【作者單位】： 揚州大學江蘇省人獸共患病學重點實驗室/江蘇省動物重要疫病與人獸共患病防控協(xié)同創(chuàng)新中心;
【基金】：國家自然科學基金資助項目(31602031) 江蘇省重點研發(fā)計劃項目(BE2015343) 江蘇省自然科學基金資助項目(BK20160466) 江蘇高校青藍工程項目(2016-05) 江蘇高校優(yōu)勢學科建設(shè)工程項目(2014-05)
【分類號】：R378.5

【參考文獻】

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本文編號：1635374