本文選題：乳鼠　切入點：胰蛋白酶　出處：《四川大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版)》2017年02期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的對比研究三種乳鼠原代心肌細胞消化分離方法,比較不同方法分離獲取的心肌細胞在數(shù)量、純度、活力上的差異,為相關(guān)實驗研究提供選擇。方法按照不同的消化方法進行分組,A組為0.08%胰蛋白酶單純消化組;B組為0.08%胰蛋白酶+0.08%Ⅱ型膠原酶混合消化組;C組為0.08%胰蛋白酶和0.08%Ⅱ型膠原酶分離消化組。記錄差速貼壁后的細胞數(shù)和活細胞率,對貼壁24h后的心肌細胞進行免疫熒光染色,計算心肌細胞純度,通過激光共聚焦顯微鏡對JC-1染色的心肌細胞進行線粒體膜電位檢測,比較紅綠熒光密度的差異,通過能量代謝間接反映細胞活力。結(jié)果三種方法分離獲得的心肌細胞數(shù)差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),而活細胞率C組高于A組(P0.01);三組分離獲得的心肌細胞純度差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);線粒體膜電位,A組熒光比值為0.928±0.078,B組熒光比值為0.943±0.099,C組熒光比值為1.160±0.089,三組之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01),C組線粒體膜電位高于A組和B組(P0.01)。結(jié)論三種消化方法在細胞數(shù)和細胞純度上無明顯差異,0.08%胰蛋白酶和0.08%Ⅱ型膠原酶分離消化的心肌細胞在活細胞率和細胞活力方面更優(yōu),可以作為常規(guī)的乳鼠心肌細胞分離方法的選擇。
[Abstract]:Objective to compare three methods of digesting and isolating primary cardiomyocytes from neonatal mice, and to compare the difference in quantity, purity and activity of cardiomyocytes obtained by different methods. Methods according to different digestion methods, group A was divided into 0.08% trypsin digestion group and 0.08% trypsin 0.08% 鈪，

本文編號：1628079