本文選題：MicroRNAs　切入點(diǎn)：恩度　出處：《華中科技大學(xué)》2011年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：目的觀察恩度對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(human umbilical vascular endothelial cells ,HUVECs)遷移及miR-126、miR-221、miR-222表達(dá)的影響,并初步探討恩度通過調(diào)控microRNAs發(fā)揮抗血管生成的作用機(jī)制。 方法采用細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn),測(cè)定50、100、200、500ng/ml恩度對(duì)HUVECs及血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)誘導(dǎo)下HUVECs遷移的影響;應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR技術(shù),檢測(cè)25、50、100、200、500ng/ml恩度對(duì)HUVECs干預(yù)前及干預(yù)1/2、1、2、4、8h后miR-126、miR-221及miR-222表達(dá)水平,并采用2~(-△△C)T法計(jì)算相對(duì)表達(dá)的倍數(shù)變化,以反映恩度對(duì)microRNAs表達(dá)的影響。 結(jié)果①不同濃度恩度均具有抑制HUVECs遷移的效應(yīng),且可下調(diào)VEGF對(duì)HUVECs的促遷移作用,并呈劑量依賴性;②miR-126、miR-221、miR-222在HUVECs中均高表達(dá);③恩度顯著下調(diào)miR-126的表達(dá)(0.07±0.01～0.56±0.04);相反,恩度明顯上調(diào)miR-221(1.45±0.06～5.12±0.48)及miR-222(1.42±0.19～6.68±1.51)的表達(dá);干預(yù)前后,miR-126、miR-221及miR-222表達(dá)水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P㩳0.01);④在所觀察范圍內(nèi),恩度對(duì)miR-126、miR-221、miR-222的表達(dá)尚無時(shí)間及濃度依賴性; 結(jié)論恩度抑制HUVECs遷移,并顯著影響HUVECs中miR-126、miR-221及miR-222表達(dá),提示恩度存在通過調(diào)控microRNAs發(fā)揮抗血管生成作用的機(jī)制。
[Abstract]:Objective to observe the effect of Endol on the migration of human umbilical vascular endothelial cells and the expression of miR-126 miR-221 miR-222 in human umbilical vein endothelial cells (HUVECs), and to explore the mechanism of Endol on anti-angiogenesis by regulating microRNAs. Methods Cell scratch assay was used to determine the effect of 500ngr / ml of 50g / ml on HUVECs migration induced by HUVECs and vascular endothelial growth factor (VEGF), and the expression of miR-126miR-221 and miR-222 before and after 1 / 21248h of HUVECs intervention and 1 / 212248h, respectively, were detected by real-time quantitative RT-PCR technique, and the expression levels of miR-126miR-221 and miR-222 were detected by real-time quantitative RT-PCR. The multiple changes of relative expression were calculated by using the method of 2CT-T to reflect the influence of Endor on the expression of microRNAs. Results (1) different concentrations of HUVECs could inhibit the migration of HUVECs, and down-regulate the effect of VEGF on the migration of HUVECs in a dose-dependent manner. In a dose-dependent manner, the expression of miR-126 in HUVECs was significantly down-regulated by 3N, and the expression of miR-126 was significantly down-regulated by 0.07 鹵0.01 ~ 0.56 鹵0.04N. Endodendron upregulated the expression of miR-221(1.45 鹵0.06 ~ 5.12 鹵0.48) and miR-222(1.42 鹵0.19 ~ 6.68 鹵1.51. There were significant differences in the expression of miR-126 miR-221 and miR-222 before and after intervention (P < 0.05). The expression of miR-126 miR-221 and miR-222 was not time-and concentration-dependent. Conclusion Endor inhibits the migration of HUVECs and significantly affects the expression of miR-126 miR-221 and miR-222 in HUVECs, suggesting that Endox may play an antiangiogenic role by regulating microRNAs.
【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號(hào)】：R363

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