發(fā)布時間：2018-03-11 22:15

  本文選題：人滋養(yǎng)層細(xì)胞　切入點：人蛻膜基質(zhì)細(xì)胞　出處：《西北農(nóng)林科技大學(xué)》2012年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：為研究轉(zhuǎn)化生長因子-β（TGF-β）與蛻膜基質(zhì)細(xì)胞分泌的趨化因子之間的關(guān)系、探討其在蛻膜基質(zhì)細(xì)胞中發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用的機制，本試驗采用胰酶-膠原酶-DNaseⅠ聯(lián)合消化的方法分離人滋養(yǎng)層細(xì)胞和人蛻膜基質(zhì)細(xì)胞，對細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)及鑒定；運用RT-PCR方法對不同濃度TGF-β處理后人蛻膜基質(zhì)細(xì)胞中趨化因子及其受體mRNA水平進(jìn)行分析，經(jīng)Western-blot方法檢測TGF-β對人蛻膜基質(zhì)細(xì)胞中趨化因子及其受體蛋白水平的影響，結(jié)果如下： 1.通過胰蛋白酶、膠原酶Ⅳ和DNaseⅠ酶聯(lián)合消化法成功分離到人絨毛滋養(yǎng)層細(xì)胞和人蛻膜基質(zhì)細(xì)胞，對兩種細(xì)胞體外培養(yǎng)體系進(jìn)行了優(yōu)化，經(jīng)本培養(yǎng)體系培養(yǎng)得到的人絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞呈片狀鋪展生長，具上皮樣形態(tài)，細(xì)胞角蛋白（Cytokeratin）染色陽性；人蛻膜基質(zhì)細(xì)胞呈細(xì)長纖維狀，E2和P4誘導(dǎo)后細(xì)胞形態(tài)逐漸變?yōu)殁g圓形，細(xì)胞輪廓清晰，胞漿顆粒豐富；波形蛋白和催乳素染色陽性。 2.分別以0ng/mL、1ng/mL、5ng/mL和10ng/mL的TGF-β1處理人蛻膜基質(zhì)細(xì)胞，RT-PCR和Western-blot檢測結(jié)果表明趨化因子配體CXCL12、CXCL16和CX3CL1mRNA和蛋白的表達(dá)均有所下降，而趨化因子受體CXCR4、CXCR6和CX3CR1mRNA和蛋白的表達(dá)則升高。在mRNA水平，各濃度的TGF-β1均能極顯著抑制CX3CL1的表達(dá)（P＜0.01）；10ng/mL的TGF-β1對CXCL12具有顯著的抑制作用（P＜0.05）；5ng/mL的TGF-β1對CXCL16有顯著抑制效應(yīng)（P＜0.05）。與趨化因子配體不同，10ng/mL的TGF-β1能夠顯著促進(jìn)趨化因子受體CXCR4和CXCR6的表達(dá)（P＜0.05）。在蛋白水平，10ng/mL的TGF-β1能夠極顯著的抑制CX3CL1的表達(dá)（P＜0.01），顯著抑制CXCL16的表達(dá)（P＜0.05）；顯著促進(jìn)CXCR6的表達(dá)（P＜0.05）。 結(jié)論：本研究建立的人絨毛滋養(yǎng)層細(xì)胞和人蛻膜基質(zhì)細(xì)胞的分離、體外培養(yǎng)和純化方法為進(jìn)一步在體外研究兩種細(xì)胞參與蛻膜化過程的分子機制研究打下了基礎(chǔ)。TGF-β1能夠下調(diào)蛻膜基質(zhì)細(xì)胞中趨化因子配體CX3CL1、CXCL12和CXCL16的表達(dá)，，上調(diào)趨化因子受體CXCR4和CXCR6的表達(dá)。結(jié)果說明TGF-β1對趨化因子配體/受體有顯著的調(diào)節(jié)作用，并通過趨化因子參與母胎界面的免疫調(diào)節(jié)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：西北農(nóng)林科技大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號】：R392

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 郭玉萍,張靜,袁瑞;自然流產(chǎn)病例的絨毛與蛻膜細(xì)胞增殖和細(xì)胞凋亡的研究[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2002年02期

2 秦立峗;陳士嶺;張曦倩;王炎秋;;人絨毛外細(xì)胞滋養(yǎng)層細(xì)胞與蛻膜基質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)模型的建立[J];南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2006年07期

3 馬玨;孫曉溪;;趨化因子及其受體在胚胎種植中的作用[J];國際生殖健康/計劃生育雜志;2009年02期

4 于潔;黃煜;崔竹梅;李大金;;趨化因子CXCL16對人早孕蛻膜免疫細(xì)胞的遷移及分泌細(xì)胞因子的調(diào)節(jié)作用[J];現(xiàn)代免疫學(xué);2009年03期

5 劉小麗;秦明春;于愛敏;王若光;李春梅;秦梨花;;人蛻膜細(xì)胞體外培養(yǎng)體系的建立[J];實用預(yù)防醫(yī)學(xué);2007年05期

6 吳霞,李大金,袁敏敏,王明雁;人早孕期絨毛和絨毛外細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞的分離、培養(yǎng)及鑒定[J];生殖與避孕;2004年02期

7 劉建新,羅麗蘭,艾繼輝,閻潔;人類蛻膜細(xì)胞體外培養(yǎng)研究[J];同濟(jì)醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2000年04期

8 韓丙辰;楊增明;;子宮內(nèi)膜蛻膜化的特征及其調(diào)節(jié)因素[J];細(xì)胞生物學(xué)雜志;2007年05期

9 王峰;孫燁;盧媛媛;馬為梅;;TGF-β1短期眼部應(yīng)用對兔眼角膜堿燒傷后整合素β1表達(dá)的作用[J];眼科學(xué)報;2008年01期

10 賀銀燕;賀曉菊;郭培奮;周雯慧;李大金;;早孕期人蛻膜趨化因子CCL2及其受體CCR2的表達(dá)及意義[J];中國免疫學(xué)雜志;2008年07期

本文編號：1600153