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變形桿菌環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增檢測(cè)法的可視化方法的比較

發(fā)布時(shí)間:2018-03-11 11:44

  本文選題:環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增 切入點(diǎn):可視化檢測(cè) 出處:《河北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)》2016年03期  論文類型:期刊論文


【摘要】:通過比較現(xiàn)有幾種可視化檢測(cè)環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增反應(yīng)產(chǎn)物的方法,建立一種可視化檢測(cè)變形桿菌的方法。利用已有的LAMP檢測(cè)變形桿菌的方法作為出發(fā)檢測(cè)體系,比較了焦磷酸鎂反應(yīng)沉淀觀察法和分別單獨(dú)添加核酸染料SYBR Green I、孔雀綠(Malachite Green)、鈣黃綠素-氯化錳(Calcein-MnCl2)的可視化檢測(cè)方法,結(jié)果顯示,焦磷酸鎂沉淀的指示效果較差,SYBR Green I法會(huì)造成實(shí)驗(yàn)場(chǎng)所的交叉污染,孔雀綠法指示反應(yīng)不夠靈敏,鈣黃綠素-氯化錳法綜合考慮較優(yōu);并證明該方法用于可視化LAMP檢測(cè)變形桿菌,具有良好的特異性,靈敏度達(dá)到4.8CFU/mL。試驗(yàn)證明鈣黃綠素-氯化錳法是一種較優(yōu)的LAMP可視化檢測(cè)法。
[Abstract]:By comparing several methods of visual detection of isothermal amplification products mediated by ring, a visual detection method for Proteus was established. The existing LAMP method for detection of Proteus was used as the starting detection system. The visual detection methods of magnesium pyrophosphate reaction precipitation observation method and separately added nucleic acid dye SYBR Green I, malachite Greenfen, Calcein-MnCl2) were compared. The indicating effect of magnesium pyrophosphate precipitation is poor. The method of SYBR Green I will cause cross contamination of the experimental site, the indicator reaction of malachite green method is not sensitive enough, and the comprehensive consideration of calcium xanthophyllin and manganese chloride method is better. It is proved that this method has good specificity and sensitivity of 4.8 CFU / mL for visual detection of Proteus by LAMP. It is proved that calcium xanthophyllin-manganese chloride method is an excellent visual detection method for LAMP.
【作者單位】: 河北農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科技學(xué)院/河北省農(nóng)產(chǎn)品加工工程技術(shù)中心;河北農(nóng)業(yè)大學(xué)理工學(xué)院;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(31371772和31071494) 河北省科技計(jì)劃項(xiàng)目(152776120D)
【分類號(hào)】:R378.2

【相似文獻(xiàn)】

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9 ;[J];;年期

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本文編號(hào):1598024

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