本文關(guān)鍵詞： Exo84基因 DYN2基因 mRNA剪接　出處：《山西醫(yī)科大學(xué)》2011年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：目的 1.試圖構(gòu)建Exo84p質(zhì)粒表達載體,為體外乙�；M蛋白是否可以與Exo84p結(jié)合做準(zhǔn)備。 2.制成組蛋白敲除/exo84-2變異菌株以觀察DYN2基因內(nèi)含子的剪接狀況。 方法: 1.從酵母基因中,經(jīng)PCR擴增出所需的Exo84p,經(jīng)純化后用XmaⅠ酶切,瓊脂糖凝膠回收后與pGEX-2T載體連接,導(dǎo)入感受態(tài)細(xì)胞DH5α中,挑選出正確的克隆。 2.用PCR方法擴增出帶LEU的基因片段,將擴增產(chǎn)物轉(zhuǎn)入目的酵母X中,得到Exo84-2變異菌株。用RT-PCR技術(shù)檢測Exo84-2突變體對DYN2基因第二外顯子的保留/切除情況。 結(jié)果我們構(gòu)建出Exo84質(zhì)粒與Exo84-2變異菌株,并在Exo84-2變異菌株的背景下觀察DYN2基因第二外顯子保留/剪接的情況。 結(jié)論1實驗成功構(gòu)建出Exo84-2變異菌株。 2在Exo84-2變異菌株中,DYN2基因第二外顯子被保留的效率比野生型低。
[Abstract]:Purpose. 1. The expression vector of Exo84p plasmid was constructed to prepare whether acetylated histone could bind to Exo84p in vitro. 2. Histone knockout mutant rexo 84-2 was prepared to observe the splicing of intron of DYN2 gene. Methods:. 1. Exo84p was amplified from yeast gene by PCR, then digested with Xma 鈪，

本文編號：1512670