本文關(guān)鍵詞： 淫羊藿苷 精索靜脈曲張 附睪 大鼠 氧化應(yīng)激　出處：《武漢大學(xué)》2012年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：背景和目的： 精索靜脈曲張是指精索內(nèi)蔓狀靜脈叢異常的迂曲和擴張,是引起男性不育的最常見原因。精索靜脈曲張在成年男性人群中的發(fā)病率為15%-20%,但它在男性不育患者中發(fā)病率顯著增加到25%-40%。精索靜脈曲張是一種漸進性疾病并常發(fā)生于青春期,絕大多數(shù)發(fā)生于左側(cè)。臨床研究表明精索靜脈曲張術(shù)后部分患者生育力并沒有改善,因此,精索靜脈曲張手術(shù)治療的效果尚存有爭議。目前中醫(yī)中藥治療精索靜脈曲張取得了一定的進展,一些中醫(yī)藥可緩解其癥狀,提高治療后懷孕率,使部分患者免受手術(shù)之苦。 淫羊藿是傳統(tǒng)的補腎壯陽中藥,是中醫(yī)中藥治療生殖內(nèi)分泌疾病過程中常用的藥物之一。淫羊藿苷(Icariin,ICA)是其主要的活性成分,屬于黃酮類化合物,對內(nèi)分泌、免疫、生殖系統(tǒng)有明顯的調(diào)節(jié)作用。實驗研究發(fā)現(xiàn),淫羊藿可使青春期前大鼠附睪及精囊腺重量增加,提高黃體生成素水平,同時可促進大鼠離體間質(zhì)細胞分泌睪酮,因此,淫羊藿苷對男性生殖系統(tǒng)及生殖內(nèi)分泌功能起促進作用。從解剖結(jié)構(gòu)來看,睪丸和附睪的大部分血供是相同的,且兩者均在陰囊內(nèi),因此,在精索靜脈曲張引起睪丸病變的同時,附睪可能同時也受累,進而發(fā)生一系列病理改變。除了上述理論基礎(chǔ),現(xiàn)已有文獻報道,精索靜脈曲張確可導(dǎo)致大鼠附睪組織結(jié)構(gòu)和功能的損害。可以初步推斷,附睪的病理改變可能是精索靜脈曲張導(dǎo)致不育的一個重要因素。目前,關(guān)于淫羊藿苷對精索靜脈曲張所致附睪病變的影響,尚無相關(guān)研究報道。有鑒于此,本實驗首先建立實驗性精索靜脈曲張大鼠模型,并以淫羊藿苷對其進行治療,通過檢測治療后大鼠附睪氧化應(yīng)激水平、結(jié)構(gòu)、功能和細胞凋亡情況,來探討淫羊藿苷對精索靜脈曲張模型大鼠附睪病變的影響。 方法： 40只青春期雄性SD大鼠隨機分為：假手術(shù)對照組(10只)、實驗性精索靜脈曲張(EV)組(15只)、淫羊藿苷(ICA)治療組(15只)。EV組和ICA治療組大鼠進行實驗性精索靜脈曲張模型的制備。EV模型的建立采用左腎靜脈部分結(jié)扎法。假手術(shù)對照組大鼠手術(shù)時只行左腎靜脈分離而不結(jié)扎。假手術(shù)對照組、EV組每天給予生理鹽水2m1灌胃,ICA治療組按100mg/kg.d劑量行淫羊蕾苷灌胃給藥。每天一次,連續(xù)給藥6周。6周后,分別處死各組大鼠；取出各大鼠左側(cè)附睪進行稱重；比色法測定附睪組織內(nèi)超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性以及丙二醛(MDA)含量；采用5-甲基苯二酚法測定唾液酸含量；用DTNB(5,5-二巰基-2,2-二硝基苯甲酸)方法檢測附睪勻漿中肉毒堿含量；HE染色觀察附睪顯微結(jié)構(gòu)變化；電鏡觀察附睪超微結(jié)構(gòu)變化；末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的原位缺口末端標記(TUNEL)法檢測附睪上皮細胞凋亡。結(jié)果： EV組大鼠附睪重量顯著低于假手術(shù)對照組(P0.01),而ICA治療組附睪重量顯著高于EV組(P0.01)。與假手術(shù)對照組比較,EV組大鼠附睪組織SOD活力和GSH-Px活力顯著下降(P0.01), MDA含量顯著升高(P0.01)；而ICA治療組能顯著提高精索靜脈曲張模型大鼠附睪組織SOD活力和GSH-Px活力,降低MDA含量,與EV組比較差異有顯著性(P0.01)。和假手術(shù)對照組比較,EV組附睪顯微結(jié)構(gòu)及超微結(jié)構(gòu)均出現(xiàn)了不同程度的病理損害,光鏡下可見附睪上皮細胞排列不規(guī)則,胞漿出現(xiàn)空泡化變性,管腔內(nèi)正常精子明顯減少,間質(zhì)水腫,小血管淤血擴張；電鏡下可見主細胞內(nèi)溶酶體增多、體積增大,胞質(zhì)內(nèi)空泡明顯增多,線粒體腫脹、嵴變模糊,基膜增厚。和EV組比較,ICA治療組附睪上皮顯微結(jié)構(gòu)及超微結(jié)構(gòu)損害明顯較輕。EV組大鼠附睪上皮細胞AI顯著高于假手術(shù)對照組(P0.01)；而ICA治療組附睪上皮細胞AI顯著低于EV組(P0.01)。EV組大鼠附睪組織唾液酸和肉毒堿含量分別顯著低于假手術(shù)對照組(P0.01)；而ICA治療組附睪組織唾液酸和肉毒堿含量分別顯著高于EV組(P0.01)。 結(jié)論： 本實驗成功地制備了實驗性大鼠靜脈曲張大鼠模型；本實驗結(jié)果顯示精索靜脈曲張可引起附睪組織發(fā)生氧化應(yīng)激,而淫羊藿苷可抑制其所致的氧化應(yīng)激；精索靜脈曲張可引起附睪組織結(jié)構(gòu)和功能的損害,而淫羊藿苷可修復(fù)這些損害；精索靜脈曲張可誘導(dǎo)附睪組織發(fā)生細胞凋亡,而淫羊藿苷可減少其所致的細胞凋亡。 總之,我們的實驗初步證實了淫羊藿苷可拮抗精索靜脈曲張所致的附睪損害,為淫羊藿苷治療精索靜脈曲張所致不育提供了依據(jù)。
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【學(xué)位授予單位】：武漢大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號】：R285.5;R-332

【參考文獻】

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