發(fā)布時(shí)間：2018-02-06 05:07

  本文關(guān)鍵詞： 蚊蟲 線粒體細(xì)胞色素c氧化酶亞基Ⅰ 分子標(biāo)記　出處：《中國(guó)寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志》2017年03期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的分析我國(guó)部分地區(qū)28種蚊蟲的線粒體細(xì)胞色素c氧化酶亞基Ⅰ(mitochondrion cytochrome c oxidase subunitⅠ,COⅠ)基因序列,探討其作為蚊蟲分子標(biāo)記的應(yīng)用潛力。方法 2015年3月至2016年10月在我國(guó)海南、廣東、廣西、云南、福建、浙江、河南、山西、天津、內(nèi)蒙古、吉林和黑龍江等12省(自治區(qū)、直轄市)的蚊蟲孳生地采集幼蟲,室內(nèi)飼養(yǎng)至羽化成蚊,在蚊蟲棲息地和蚊蟲監(jiān)測(cè)點(diǎn),采用燈誘法和人誘法采集成蚊。所有成蚊經(jīng)形態(tài)學(xué)鑒定后,提取單只蚊蟲基因組DNA,采用國(guó)際雙翅目通用引物PCR擴(kuò)增并克隆線粒體COⅠ基因5′端片段,并進(jìn)行測(cè)序。所得COⅠ基因序列上傳Gen Bank獲取登錄號(hào)。序列通過Clustal1.83和MEGA5.05軟件進(jìn)行多序列比對(duì),用DNAMAN9.0軟件分析同源性。采用Mega5.05軟件進(jìn)行序列特征分析、計(jì)算遺傳距離。每種蚊蟲隨機(jī)選擇1~4條線粒體COⅠ基因序列,采用鄰接法(NJ)構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育進(jìn)化樹。結(jié)果共采集3亞科6屬28種301只蚊蟲,分別為伊蚊屬(Aedes)的白紋伊蚊(Ae.albopictus)等5種、按蚊屬(Anopheles)的中華按蚊(An.sinensis)等6種(亞種)、庫(kù)蚊屬(Culex)的二帶喙庫(kù)蚊(Cx.bitaeniorhynchus)等14種(亞種)、阿蚊屬(Armigeres)的騷擾阿蚊(Ar.subalbatus)、曼蚊屬(Mansonia)的常型曼蚊(Ma.uniformis)和巨蚊屬(Toxorhynchites)的華麗巨蚊(Tx.splendens)。PCR擴(kuò)增結(jié)果顯示,28種蚊蟲線粒體COⅠ基因的長(zhǎng)度約711 bp,經(jīng)多序列比對(duì)排齊后長(zhǎng)度為651 bp。不同種別蚊蟲的線粒體COⅠ序列同源性范圍為97.85%~99.97%。種內(nèi)K2P遺傳距離為0.15%~2.89%,屬內(nèi)種間遺傳距離為0.25%~14.50%。其中,按蚊屬6種蚊蟲COⅠ序列存在153個(gè)變異位點(diǎn),131個(gè)簡(jiǎn)約信息位點(diǎn),T+A平均含量為67.70%;編碼的217個(gè)氨基酸殘基中保守氨基酸206個(gè)(占94.9%);6種蚊蟲的核苷酸同源性為98.31%~99.72%,種內(nèi)K2P遺傳距離為0.41%~1.56%,種間K2P遺傳距離為1.07%~14.50%。28種蚊蟲(60條)COⅠ序列的系統(tǒng)發(fā)育樹分析結(jié)果顯示,種團(tuán)內(nèi)近緣種(尖音庫(kù)蚊、淡色庫(kù)蚊和致倦庫(kù)蚊)聚在一起,但近緣種之間未完全隔開;白跗按蚊(An.albitarsis)和迷走按蚊(An.vagus)聚在一起,其余23種蚊蟲分別以種為單位聚在一起。結(jié)論基于線粒體COⅠ基因的分子標(biāo)記可以區(qū)分捕獲蚊蟲的部分蚊種,但尚未能有效及準(zhǔn)確地區(qū)分近緣種。
[Abstract]:Objective to analyze the mitochondrial cytochrome c oxidase subunit 鈪，

本文編號(hào)：1493653