瓊脂磁珠消減SELEX技術(shù)篩選HIV P24抗原適配體
本文關(guān)鍵詞: HIV P抗原 消減SELEX技術(shù) DNA適配體 靶標(biāo)替換 出處:《西北師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)》2016年05期 論文類型:期刊論文
【摘要】:建立以羧基化瓊脂磁珠為篩選介質(zhì),快速篩選高特異性、高親和力的HIV P24抗原適配體的方法.利用消減SELEX技術(shù)及靶標(biāo)替換的方法,以HIV P24抗原作為靶分子,羧基化瓊脂磁珠為載體,進(jìn)行6輪篩選,篩選到3條特異性核酸適配體.特異性檢測(cè)表明,篩選得到的HIV P24抗原適配體與HIV P24抗原的結(jié)合解離常數(shù)均在納摩爾級(jí)水平.該方法為HIV早期檢測(cè)提供了新的檢測(cè)技術(shù),對(duì)適配體與靶分子相互作用機(jī)理的研究具有重要價(jià)值.
[Abstract]:To establish the carboxylated agar beads to screening medium, rapid screening of high specificity, high affinity HIV P24 antigen aptamer. Using subtractive SELEX technique and target replacement, with HIV P24 as target antigen, carboxylated agar beads as the carrier, the 6 round of screening, screened 3 specific nucleic acid aptamer. Specific detection results showed that, with the dissociation constant of screening HIV P24 antigen by aptamer P24 antigen and HIV were in the nanomolar level. This method provides a new detection technique for early detection of HIV, interaction mechanism research has important value for aptamer and target molecule.
【作者單位】: 西北師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;甘肅省醫(yī)學(xué)科學(xué)研究院醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究中心;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金地區(qū)基金資助項(xiàng)目(30960104;30770639)
【分類號(hào)】:R392
【正文快照】: P24抗原是HIV-1的核心抗原,機(jī)體感染HIV-1后,P24在血清中出現(xiàn)的時(shí)間較早,一般在HIV-1感染后2~3周就可以檢測(cè),可作為艾滋病窗口期檢測(cè)的血清標(biāo)志物,通過(guò)檢測(cè)血液中的P24,可達(dá)到早期診斷和治療的目的[1].DNA適配體相比于抗體檢測(cè)具有許多優(yōu)點(diǎn):1 DNA適配體更穩(wěn)定,不易降解,可長(zhǎng)期
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,本文編號(hào):1464686
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