識(shí)別多種種屬來(lái)源間充質(zhì)干細(xì)胞核酸適配體的篩選及鑒定
本文關(guān)鍵詞: 間充質(zhì)干細(xì)胞 適配體 活細(xì)胞-SELEX 出處:《軍事醫(yī)學(xué)》2017年03期 論文類(lèi)型:期刊論文
【摘要】:目的篩選能識(shí)別多種屬來(lái)源的間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)的核酸適配體,并對(duì)其進(jìn)行鑒定。方法從幼兔股骨骨片分離MSC并進(jìn)行成骨、成脂誘導(dǎo)分化鑒定。以分離得到的兔源性MSC為篩選靶標(biāo),利用細(xì)胞SELEX技術(shù)篩選核酸適配體。將第5輪富集文庫(kù)進(jìn)行克隆、測(cè)序,利用RNA structure、MEME軟件分析獲得候選序列,利用流式細(xì)胞儀鑒定候選適配體與兔、大鼠、人源性MSC的結(jié)合。結(jié)果從兔股骨骨片分離得到的MSC可誘導(dǎo)向成骨、成脂分化。經(jīng)過(guò)5輪SELEX篩選獲得兔MSC富集文庫(kù)。候選適配體5-1-12不僅結(jié)合兔MSC,也識(shí)別大鼠和人源性MSC。結(jié)論活細(xì)胞SELEX篩選獲得與多種屬來(lái)源MSC結(jié)合的核酸適配體5-1-12。
[Abstract]:Objective to screen and identify the aptamers of mesenchymal stem cells (MSCs) from various genera. Methods MSC was isolated from femoral bone slices of young rabbits and osteogenesis was carried out. The aptamer of nucleic acid was screened by cell SELEX technique. The fifth enriched library was cloned and sequenced. The candidate sequences were obtained by RNA structuremmet software, and the candidate aptamers, rabbits and rats were identified by flow cytometry. Results MSC isolated from rabbit femur bone could induce osteogenesis. After five rounds of SELEX screening, rabbit MSC enrichment library was obtained. The candidate aptamer 5-1-12 not only binds to rabbit MSC. Conclusion SELEX screening of living cells obtained the aptamer 5-1-12 which binds to MSC from a variety of genuses.
【作者單位】: 廣西醫(yī)科大學(xué);武漢市第三醫(yī)院;湖北中醫(yī)藥大學(xué);軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81572846) 湖北省自然科學(xué)基金重點(diǎn)資助項(xiàng)目(2015CFA079)
【分類(lèi)號(hào)】:R329.2
【正文快照】: 間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells,MSC)是來(lái)源于發(fā)育早期的中胚層和外胚層的一群多能干細(xì)胞,具有多向分化潛能、造血支持和促進(jìn)干細(xì)胞植入、免疫調(diào)控和自我復(fù)制等特點(diǎn)。1976年首次在小鼠骨髓中分離得到MSC,隨后發(fā)現(xiàn)多種組織中都可分離到MSC,如脂肪、滑膜、骨骼、肌肉、肺
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,本文編號(hào):1451209
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