本文關(guān)鍵詞：錳離子對肺炎鏈球菌影響的蛋白質(zhì)組學(xué)研究　出處：《暨南大學(xué)》2011年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： 肺炎鏈球菌 金屬蛋白 錳 蛋白質(zhì)組學(xué)

【摘要】：對于很多致病性微生物而言,錳離子是其生存和感染的必須微量元素,然而宿主環(huán)境中的錳離子是非常微量的,僅從幾個納摩爾到幾十微摩爾,因此,致病菌必須保證自己能從宿主環(huán)境中攝入足量的錳。肺炎鏈球茵是一種常見的致病性微生物,能在人群當(dāng)中引發(fā)多種疾病,如肺炎、中耳炎、細(xì)菌性腦膜炎等。根據(jù)已有的報道,肺炎鏈球菌中存在著一個重要的ABC錳轉(zhuǎn)運蛋白系統(tǒng)PsaABC。其中,PsaA是位于細(xì)胞膜外的金屬結(jié)合受體,這個蛋白的缺失對細(xì)菌的毒力、生長等有較大的影響。 目的：通過蛋白質(zhì)組學(xué)的方法,了解錳離子缺失對肺炎鏈球菌的影響。 方法：將肺炎鏈球菌分別培養(yǎng)在含錳與不含錳的限制性培養(yǎng)基中,分別收集全蛋白與膜蛋白,通過二維電泳尋找差異蛋白,并利用質(zhì)譜技術(shù)對其進(jìn)行鑒定。另外,將肺炎鏈球菌的野生型D39菌株和PsaA突變株分別培養(yǎng)于普通培養(yǎng)基中,用同樣的方式對細(xì)菌的全蛋白進(jìn)行比較。 結(jié)果：肺炎鏈球菌在無錳條件下培養(yǎng)時,其全蛋白組分中有29個蛋白發(fā)生下調(diào),3個發(fā)生上調(diào)；其膜蛋白組分中有15個蛋白發(fā)生下調(diào),8個發(fā)生上調(diào)；細(xì)菌無錳培養(yǎng)時胞內(nèi)的鐵離子濃度是有錳培養(yǎng)時的2倍左右。PsaA突變株中,有50個蛋白發(fā)生下調(diào),24個發(fā)生上調(diào)。 結(jié)論：環(huán)境中錳離子的缺失,導(dǎo)致肺炎鏈球菌中很多蛋白的表達(dá)發(fā)生下調(diào),這些蛋白包括各種與代謝有關(guān)的酶、一些糖類和肽類的轉(zhuǎn)運蛋白,核糖體蛋白等。另外,培養(yǎng)環(huán)境中錳離子的缺乏將使得細(xì)菌從環(huán)境中攝取更多的鐵離子以實現(xiàn)一定的代償作用。PsaA是一個很重要的錳攝取蛋白,它的缺失不僅引起胞內(nèi)錳離子的下降,還引起大量其他的蛋白表達(dá)的變化。
[Abstract]:For many pathogenic microorganisms, manganese ions are essential trace elements for their survival and infection. However, manganese ions in host environment are very small, ranging from a few nanomolor to dozens of micromoles, so. Pathogenic bacteria must ensure that they can absorb enough manganese from the host environment. Pneumonia streptomyte is a common pathogenic microorganism, which can cause many diseases in the population, such as pneumonia, otitis media. Bacterial meningitis and so on. According to existing reports, there is an important ABC manganese transporter system in Streptococcus pneumoniae, in which PsaA is a metal binding receptor located outside the cell membrane. The absence of this protein has a greater effect on the virulence and growth of bacteria. Objective: to investigate the effect of manganese deficiency on Streptococcus pneumoniae by proteomics. Methods: Streptococcus pneumoniae were cultured in the restricted medium containing manganese and no manganese respectively. The whole protein and membrane protein were collected respectively and the differential proteins were found by two-dimensional electrophoresis. In addition, the wild-type D39 strain and the PsaA mutant of Streptococcus pneumoniae were cultured in ordinary culture medium. The whole proteins of bacteria were compared in the same way. Results: when Streptococcus pneumoniae was cultured without manganese, 29 proteins were down-regulated and 3 upregulated. 15 of the membrane protein components were down-regulated and 8 were up-regulated. 50 proteins were down-regulated and 24 upregulated in the Mn-free culture of bacteria in which the concentration of Fe ~ (2 +) in the cells was about 2 times as high as that in the Mn-free culture. Conclusion: the loss of manganese ions in the environment leads to the down-regulation of many proteins in Streptococcus pneumoniae including various metabolism-related enzymes and some carbohydrate and peptide transporters. In addition, the lack of manganese ions in culture environment will make bacteria absorb more iron ions from the environment to achieve a certain compensatory effect. PsaA is a very important manganese uptake protein. Its deletion not only caused the decrease of intracellular manganese ion, but also caused the change of other protein expression.
【學(xué)位授予單位】：暨南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號】：R378

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本文編號：1435738