發(fā)布時間：2018-01-14 21:02

  本文關(guān)鍵詞：SHBG基因敲除小鼠模型的建立及其表型分析　出處：《中國生物工程雜志》2017年08期 　論文類型：期刊論文

  更多相關(guān)文章： 性激素結(jié)合球蛋白 條件性基因敲除 Cre/Loxp 妊娠期糖尿病

【摘要】：目的:建立性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)基因條件敲除小鼠模型,為探討胎盤組織中SHBG在體內(nèi)的生理功能及其與妊娠期糖尿病發(fā)病關(guān)系提供實驗手段。方法:首先運用生物信息學(xué)手段確定小鼠SHBG基因組序列,構(gòu)建SHBG打靶載體,以電穿孔方法將其導(dǎo)入小鼠ES細(xì)胞,篩選培養(yǎng)陽性ES細(xì)胞并行PCR鑒定,并將正確同源重組的ES細(xì)胞注射進(jìn)小鼠囊胚,移入受體小鼠子宮;將獲得的嵌合體小鼠與C57BL/6J小鼠交配,篩選后獲得Flox小鼠,該小鼠與EIIa-Cre轉(zhuǎn)基因小鼠雜交,子代多次自交獲得SHBG全身基因敲除(SHBG~(-/-))的小鼠。結(jié)果:運用同源重組及ES細(xì)胞技術(shù)建立了SHBG基因的Flox小鼠,并利用Cre/Loxp重組酶系統(tǒng)建立了SHBG基因全身敲除小鼠模型,PCR方法從基因水平證明了SHBG基因Flox小鼠及SHBG基因全身敲除小鼠模型建立成功。對基因敲除鼠進(jìn)行初步表型分析發(fā)現(xiàn):SHBG基因全身敲除小鼠的生長發(fā)育與野生型小鼠相比無明顯肉眼所見異常,SHBG基因全身敲除雌雄小鼠均具有生殖能力。結(jié)論:成功建立SHBG基因全身敲除小鼠模型,通過對基因敲除鼠進(jìn)行初步表型分析,發(fā)現(xiàn)SHBG基因全身敲除小鼠外觀上發(fā)育正常,為進(jìn)一步研究SHBG在妊娠期糖尿病中的作用奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:Objective : To establish a mouse model of SHBG gene knockout mice by means of bioinformatics .

【作者單位】： 中國醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院;上海南方模式生物研究中心;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項目(81170591;81300511)
【分類號】：R-332;R714.256
【正文快照】： 性激素結(jié)合球蛋白(sex hormone-binding globulin,SHBG),是一種能結(jié)合性激素甾體的球蛋白,主要由肝臟產(chǎn)生,胎盤[1]等不同的性甾體激素靶組織亦有產(chǎn)生。SHBG能特異性地與性激素結(jié)合并參與其轉(zhuǎn)運,調(diào)控血液中有生物活性的性激素濃度[2],同時也受胰島素、甲狀腺素等多種因素的調(diào)節(jié)

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本文編號：1425264