本文關(guān)鍵詞：腸道菌群失衡前后小鼠派氏結(jié)內(nèi)T淋巴細(xì)胞亞群分析及功能變化的研究　出處：《大連醫(yī)科大學(xué)》2012年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：目的： 通過分析小鼠腸道菌群失衡前后派氏結(jié)（Peyer’s patches,PP）內(nèi)T淋巴細(xì)胞及亞群數(shù)量以及細(xì)胞因子表達的變化，闡明菌群失衡對小鼠派氏結(jié)內(nèi)T淋巴細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的影響。 方法： 1.沿用抗生素頭孢曲松鈉灌胃的方法建立小鼠腸道菌群失衡模型。以頭孢曲松鈉終濃度為8g/kg/d劑量，連續(xù)灌胃8天，建立小鼠重度菌群失衡模型；以頭孢曲松鈉終濃度為4g/kg/d劑量，連續(xù)灌胃4天，建立小鼠輕度菌群失衡模型。 2.利用EDTA振蕩法去上皮和膠原酶Ⅳ消化法制備正常組、輕度菌群失衡組、重度菌群失衡組小鼠腸派氏結(jié)總單細(xì)胞懸液。以本管未添加抗體細(xì)胞作為陰性對照，調(diào)整細(xì)胞濃度為106個/管，三聯(lián)熒光抗體標(biāo)記流式細(xì)胞術(shù)檢測T淋巴細(xì)胞CD3+、CD4+、CD8+和調(diào)節(jié)性T細(xì)胞CD4+CD25+的變化，并計算CD4/CD8比值。 3.利用RT-PCR法檢測正常組、輕度菌群失衡組和重度菌群失衡組派氏結(jié)內(nèi)Th1類淋巴細(xì)胞分泌的IL-2、IFN-γ和Th2類淋巴細(xì)胞分泌的IL-4、IL-10mRNA表達量的變化。 結(jié)果： 1.與正常組比較，輕度組和重度組派氏結(jié)內(nèi)總CD3+T細(xì)胞比例上升(p0.05)，CD4+T細(xì)胞比例上升(p0.05)；CD8+T細(xì)胞比例下降(p0.05)；CD4/CD8比值升高(p0.05)；CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞比例減少(p0.05)。 2.通過RT-PCR法對各細(xì)胞因子mRNA表達量的變化檢測，與正常組比較，輕度組和重度組中Th1類細(xì)胞分泌的IL-2和IFN-γ的表達量減少，Th2類細(xì)胞分泌的IL-4和IL-10的表達量逐漸升高。 結(jié)論： 1.腸道優(yōu)勢菌群失衡導(dǎo)致派氏結(jié)內(nèi)T淋巴細(xì)胞構(gòu)成比例發(fā)生變化，其中總T淋巴細(xì)胞比例隨著失衡程度的加深不斷升高，輔助性T細(xì)胞比例較失衡前升高，細(xì)胞毒性T細(xì)胞和調(diào)節(jié)性T細(xì)胞比例降低。 2.腸道優(yōu)勢菌群失衡導(dǎo)致派氏結(jié)內(nèi)與體液免疫相關(guān)的IL-2和IFN-γ表達量升高，，與細(xì)胞免疫相關(guān)的IL-4和IL-10表達量降低，促使免疫反應(yīng)向體液免疫方向偏移。
[Abstract]:Objective: The changes of the number of T lymphocytes and subsets and the expression of cytokines were analyzed before and after intestinal microflora imbalance in mice. To elucidate the effect of microflora imbalance on the structure and function of T lymphocytes in Pak's knots of mice. Methods: 1. The model of intestinal flora imbalance in mice was established by intragastric administration of ceftriaxone sodium. The final concentration of ceftriaxone sodium was 8 g / kg / d for 8 days. To establish the model of severe disequilibrium of microflora in mice; A model of mild microflora imbalance in mice was established by intragastric administration of ceftriaxone sodium at a dose of 4 g / kg / d for 4 days. 2.Epithelialization and collagenase 鈪

本文編號：1415857