發(fā)布時間：2018-01-12 17:27

  本文關鍵詞：懸浮組織塊法分離培養(yǎng)SD大鼠脂肪干細胞的實驗研究　出處：《中國免疫學雜志》2017年08期 　論文類型：期刊論文

  更多相關文章： 懸浮組織塊法 SD大鼠脂肪干細胞 分離 培養(yǎng)

【摘要】：目的:建立SD大鼠脂肪干細胞懸浮組織塊分離培養(yǎng)法。方法:取正常SD大鼠股溝處脂肪組織,用懸浮組織塊法和組織塊貼壁法分離培養(yǎng)SD大鼠脂肪干細胞,觀察細胞的生長狀況及形態(tài)特征。取第3代對數(shù)期細胞,CCK-8法繪制其生長曲線;免疫熒光法檢測其表面抗原CD29、CD44、CD45的表達情況;分別用成脂、成骨誘導培養(yǎng)液進行誘導分化,油紅O、茜素紅染色定性鑒定。結果:兩種方法體外培養(yǎng)得到的SD大鼠脂肪干細胞形態(tài)為梭形纖維樣,生長力旺盛,生長曲線為典型的"S"型;免疫熒光法檢測顯示第3代細胞強表達CD29、CD44,CD45表達陰性;細胞成脂誘導培養(yǎng)14 d后,油紅O染色為陽性;成骨誘導培養(yǎng)14 d后,茜素紅染色為陽性。結論:懸浮組織塊法可以分離培養(yǎng)出SD大鼠脂肪干細胞,方法簡便,為體外分離培養(yǎng)SD大鼠脂肪干細胞提供了一種新的方法。
[Abstract]:Objective: to establish a method for the isolation and culture of adipose stem cell suspension tissue mass in SD rats. Methods: the fat tissue in the groin of normal SD rats was obtained. Sprague-Dawley adipose stem cells were isolated and cultured by suspension tissue block method and tissue mass adherence method, and the growth status and morphological characteristics of the cells were observed. The growth curve was drawn by CCK-8 method in the logarithmic phase of the third generation. Immunofluorescence assay was used to detect the expression of CD29, CD4, CD4 and CD45. The adipose stem cells of SD rats were identified qualitatively by oil red O and alizarin red staining. Results: the morphology of adipose stem cells of SD rats in vitro was fusiform fiber like. The growth curve is typical "S" type. Immunofluorescence assay showed that the expression of CD29, CD44and CD45 was negative in the third generation cells. Oil red O staining was positive after 14 days of lipogenic culture. After 14 days of osteogenic induction, alizarin red staining was positive. Conclusion: the method of suspension tissue mass can isolate and culture SD rat adipose stem cells, and the method is simple and convenient. It provides a new method for isolation and culture of adipose stem cells from SD rats in vitro.
【作者單位】： 中國人民解放軍武漢總醫(yī)院醫(yī)學實驗科;
【分類號】：R329.2
【正文快照】： 脂肪組織是成體間充質(zhì)干細胞的重要來源之一,其提供的間充質(zhì)干細胞數(shù)量遠大于其他組織來源。脂肪干細胞(Adipose-derived stem cells,ASCs)具有良好的增殖能力和自我更新能力,在合適的條件下能夠分化為脂肪細胞、成骨細胞、軟骨細胞、神經(jīng)細胞、內(nèi)皮細胞等,在基礎醫(yī)學研究領域

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本文編號：1415242