本文關(guān)鍵詞：LOX-1在C反應(yīng)蛋白誘導(dǎo)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞組織因子表達(dá)中的作用　出處：《重慶醫(yī)科大學(xué)》2012年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： 凝集素樣氧化型低密度脂蛋白受體-1 C-反應(yīng)蛋白 組織因子 血栓

【摘要】：目的：目前C反應(yīng)蛋白（CRP）被認(rèn)為是一種獨(dú)立、強(qiáng)烈的心血管疾病危險(xiǎn)因素，，C反應(yīng)蛋白能上調(diào)血管內(nèi)皮細(xì)胞組織因子（TF）基因的表達(dá)。我們研究凝集素樣氧化型低密度脂蛋白受體-1（LOX-1）在C反應(yīng)蛋白誘導(dǎo)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECs)組織因子表達(dá)中的作用，以探討CRP在動(dòng)脈血栓形成中可能的作用的。 方法：構(gòu)建人重組質(zhì)粒pTracer CMV2-CRP并將其轉(zhuǎn)染HUVECs細(xì)胞,RT-PCR、Western blot法鑒定CRP在HUVECs中轉(zhuǎn)錄水平及蛋白水平的表達(dá)。再用質(zhì)粒pTracer CMV2-CRP轉(zhuǎn)染HUVECs細(xì)胞,分正常對照組、空質(zhì)粒GFP組和CRP-GFP組（n=3），RT-PCR檢測LOX-1、TF的mRNA表達(dá)，Western blot檢測各組LOX-1、TF、P-ERK1/2、T-ERK1/2、P-JNK、T-JNK蛋白表達(dá)。CRP-GFP組分別加LOX-1阻斷劑、ERK1/2阻斷劑（U0126）、JNK阻斷劑（SP600125），Western blot檢測TF蛋白. 結(jié)果：在CRP質(zhì)粒轉(zhuǎn)染的HUVEC細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)綠色熒光蛋白及檢測到CRP的mRNA和蛋白表達(dá)。用表達(dá)人CRP的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染HUVECs顯著增加LOX-1mRNA和蛋白表達(dá)（0.70±0.03vs0.24±0.01,0.6616±0.0200vs0.2558±0.0400, P＜0.05）、TF的mRNA和蛋白表達(dá)(0.442±0.040vs0.146±0.030，0.7274±0.0200vs0.2174±0.0200,P＜0.05)。CRP激活了ERK1/2MAPK,未激活JNK MAPK。CRP上調(diào)TF表達(dá)被ERK1/2阻斷劑而非JNK阻斷劑阻斷.抗LOX-1的中和抗體顯著減少CRP誘導(dǎo)的TFmRNA和蛋白表達(dá)（0.264±0.030vs0.442±0.040,0.3244±0.0400vs0.7274±0.0200,P＜0.05）。 結(jié)論：構(gòu)建的重組質(zhì)粒成功轉(zhuǎn)染HUVEC細(xì)胞，CRP基因在CRP質(zhì)粒轉(zhuǎn)染的HUVEC細(xì)胞中成功轉(zhuǎn)錄和翻譯。CRP誘導(dǎo)HUVECs細(xì)胞LOX-1表達(dá)上調(diào)，并通過LOX-1受體這一新途徑上調(diào)TF表達(dá)，且CRP通過ERK1/2MAPK信號途徑非JNK MAPK途徑上調(diào)了HUVEC細(xì)胞TF的表達(dá)。
[Abstract]:Objective : To investigate the role of lectin - like oxidized low - density lipoprotein receptor - 1 ( LOX - 1 ) in the expression of tissue factor ( TF ) in human umbilical vein endothelial cells induced by C - reactive protein . Methods : Human recombinant plasmid pTracer CMV2 - CRP was constructed . The expression of transcription level and protein level was determined by RT - PCR and Western blot . Results : The expression of mRNA and protein was detected in HUVEC transfected with CRP plasmid . The expression of LOX - 1mRNA and protein was significantly increased ( 0.70 鹵 0.03 vs 0.24 鹵 0.01 , 0.6616 鹵 0.0200 vs 0.2174 鹵 0.0200 , P < 0.05 ) . The expression of TF mRNA and protein was significantly decreased by the neutralizing antibody against LOX - 1 ( 0.264 鹵 0.030 vs 0.442 鹵 0.040 , 0.3244 鹵 0.0400vs0.7274 鹵 0.0200 , P < 0.05 ) . Conclusion : The recombinant plasmid constructed successfully transfected HUVEC cells and CRP gene was successfully transcribed and translated into HUVEC cells transfected with CRP plasmid . The expression of LOX - 1 in HUVEC induced by CRP was up - regulated and the expression of TF was up - regulated by the new pathway of LOX - 1 receptor .

【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號】：R363

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本文編號：1405202