Notch-1基因與人神經膠質瘤細胞自噬相關性的研究
發(fā)布時間:2018-01-09 05:24
本文關鍵詞:Notch-1基因與人神經膠質瘤細胞自噬相關性的研究 出處:《福建醫(yī)科大學》2012年碩士論文 論文類型:學位論文
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【摘要】:目的: 觀察上調和下調Notch-1基因表達時人神經膠質瘤細胞的自噬現象,探討Notch-1基因參與人神經膠質瘤細胞自噬的可能機制。 方法: 利用表達Notch1-shRNA和Notch-1胞內段(Notch-1intracellular domain,NICD)的慢病毒感染人膠質瘤U251細胞,通過RT-PCR和Western Blotting法鑒定Notch-1表達下調或NICD表達上調的U251細胞;應用單丹(磺)酰戊二胺(Monodansylcadaverine,,MDC)染色法觀察細胞自噬現象;通過Western-blotting和細胞免疫染色法檢測自噬相關蛋白LC-3(microtubule-associated protein1lightchain3,微管相關蛋白1輕鏈3)和Beclin-1的表達情況。 結果: Notch-1RNA干擾慢病毒能有效下調U251細胞Notch-1的表達,而NICD過表達慢病毒能顯著上調U251細胞NICD的表達;MDC熒光染色法發(fā)現,Notch-1下調的神經膠質瘤U251細胞中可觀察到點狀自噬囊泡(autophagicvacuoles,AVs),Western-blotting和細胞免疫染色法結果顯示,在Notch-1表達下調的神經膠質瘤U251細胞中,自噬相關蛋白LC-3和Beclin-1表達增高。 結論: Notch-1表達下調的人神經膠質瘤細胞可觀察到自噬現象,Notch-1表達下調可能導致LC-3和Beclin-1表達上調而誘導膠質瘤細胞自噬。
[Abstract]:Objective:
To observe the expression of Notch-1 gene up-regulated and down regulated autophagy in human glioma cells, and explore the possible mechanism of Notch-1 gene involved in autophagy in human glioma cells.
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本文編號:1400168
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