本文關(guān)鍵詞：一株特異性識別B7-H3雜交瘤單克隆抗體Y4F11的分析和鑒定　出處：《細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志》2016年10期 　論文類型：期刊論文

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【摘要】：目的研制小鼠抗人惡性胸水細(xì)胞表面分子的單克隆抗體(m Ab),并對其中Y4F11識別的抗原進(jìn)行鑒定和驗證。方法以胸水細(xì)胞為免疫原,常規(guī)免疫BALB/c小鼠、采用雜交瘤技術(shù)進(jìn)行細(xì)胞融合和篩選陽性雜交瘤克隆;選取Y4F11為實驗對象,采用流式細(xì)胞術(shù)分析其在初始和活化免疫細(xì)胞(T細(xì)胞、B細(xì)胞、NK細(xì)胞和單核細(xì)胞)上的結(jié)合情況;通過免疫共沉淀法獲得與Y4F11特異性結(jié)合的條帶、割膠、蛋白質(zhì)譜測序后拼接出肽段,并進(jìn)行BLAST分析比對;采用Western blot法、Dot-blot法及流式細(xì)胞術(shù)驗證Y4F11與B7同源物3(B7-H3)的抗體抗原關(guān)系。結(jié)果獲得78株能持續(xù)分泌識別惡性胸水細(xì)胞表面表達(dá)分子的抗體的雜交瘤細(xì)胞株,其中Y4F11與胸水細(xì)胞結(jié)合最高;Y4F11特異識別的條帶相對分子質(zhì)量(Mr)大小約為50 000,質(zhì)譜結(jié)果經(jīng)BLAST比對為B7-H3分子;繼而的結(jié)合實驗顯示,Y4F11可以與B7-H3的轉(zhuǎn)基因細(xì)胞結(jié)合,也可以與B7-H3融合蛋白有效地結(jié)合,B7-H3在免疫細(xì)胞表面表達(dá)的模式與Y4F11抗體在這些細(xì)胞上的結(jié)合一致,表明Y4F11識別的抗原分子為B7-H3。結(jié)論成功獲得1株持續(xù)表達(dá)B7-H3 m Ab的雜交瘤細(xì)胞株Y4F11,為進(jìn)一步研究分析B7-H3的生物學(xué)功能提供了物質(zhì)基礎(chǔ)。
[Abstract]:Objective To develop a monoclonal antibody ( m Ab ) of mouse anti - human malignant pleural effusion cell surface molecule , and to identify and verify the antigen recognized by Y4F11 .

【作者單位】： 蘇州大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與生物科學(xué)學(xué)院;蘇州大學(xué)附屬第一醫(yī)院江蘇省臨床免疫研究所;江蘇省干細(xì)胞與生物醫(yī)用材料重點實驗室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(31170834)
【分類號】：R392
【正文快照】： B7同源物3(B7 homolog3,B7-H3)是2001年Chapoval等[1]在人樹突狀細(xì)胞(dendritic cells,DC)的c DNA文庫中首先發(fā)現(xiàn)的,人B7-H3分子有2種不同剪切體:B7-H3(2Ig B7-H3)和B7-H3b(4Ig B7-H3)。B7-H3b胞外段由Ig V1-Ig C1-Ig V2-Ig C2四個免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域組成,故又稱為4Ig B7-H3,而

【參考文獻(xiàn)】

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1 徐海燕;馬泓冰;徐穎;劉琳;於葛華;胡玉敏;邱玉華;張學(xué)光;;一株抗人BLys單克隆抗體的制備及其生物學(xué)功能研究[J];現(xiàn)代免疫學(xué);2006年01期

2 邱玉華，張學(xué)光，謝煒，朱學(xué)東;一種顯著提高小鼠生產(chǎn)單抗腹水產(chǎn)量的新方法[J];中國免疫學(xué)雜志;1995年06期

【共引文獻(xiàn)】

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1 時正朋;胡玉敏;陳翰卿;傅豐慶;張學(xué)光;;一株特異性識別B7-H3雜交瘤單克隆抗體Y4F11的分析和鑒定[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2016年10期

2 宋華峰;齊Z，

本文編號：1391254