體外定向誘導(dǎo)人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞向骨、軟骨及脂肪細(xì)胞的分化
本文關(guān)鍵詞:體外定向誘導(dǎo)人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞向骨、軟骨及脂肪細(xì)胞的分化 出處:《中國組織工程研究》2017年01期 論文類型:期刊論文
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【摘要】:背景:人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞屬于成體干細(xì)胞,在體外不同條件下誘導(dǎo)分化為骨、軟骨及其他結(jié)締組織,較其他類型間充質(zhì)干細(xì)胞,因其來源廣泛,分離無創(chuàng)傷,較低的免疫原性、生長周期短等特點(diǎn),是組織工程種子細(xì)胞的重要來源。目的:探討人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞是否具有間充質(zhì)干細(xì)胞特性及誘導(dǎo)成骨、軟骨及脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)分化的能力。方法:取足月產(chǎn)胎盤羊膜組織,酶消化法分離人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞,取第3代細(xì)胞分別加入成骨、成軟骨及成脂誘導(dǎo)液的培養(yǎng)基進(jìn)行誘導(dǎo)。結(jié)果與結(jié)論:(1)茜素紅染色顯示,成骨誘導(dǎo)后細(xì)胞存在多個(gè)礦化結(jié)節(jié),細(xì)胞中堿性磷酸酶活性明顯增加;(2)甲苯胺藍(lán)染色顯示,成軟骨誘導(dǎo)后細(xì)胞基質(zhì)中分泌大量的糖胺聚糖;(3)油紅O染色顯示,成脂誘導(dǎo)后,細(xì)胞漿內(nèi)可見脂滴;(4)實(shí)時(shí)熒光PCR結(jié)果顯示,成骨、成軟骨及成脂誘導(dǎo)21 d后,相關(guān)基因表達(dá)較7 d時(shí)明顯增高;(5)結(jié)果人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞具有向成骨細(xì)胞,軟骨細(xì)胞及脂肪細(xì)胞的潛能,可選作為組織工程學(xué)的種子細(xì)胞。
[Abstract]:Background: human amniotic mesenchymal stem cells (HMMSCs) are adult stem cells, which are differentiated into bone, cartilage and other connective tissues under different conditions in vitro. Compared with other types of mesenchymal stem cells, human amniotic mesenchymal stem cells are isolated without trauma because of their wide range of origin. Low immunogenicity and short growth cycle are important sources of seed cells for tissue engineering. Objective: to investigate whether human amniotic mesenchymal stem cells have the characteristics of mesenchymal stem cells and induce osteogenesis. Methods: human amniotic mesenchymal stem cells were isolated by enzyme digestion and the third passage cells were added to osteogenesis. Results and conclusion: alizarin red staining showed that there were many mineralized nodules and alkaline phosphatase activity in osteoblasts after osteogenesis induction. (2) toluidine blue staining showed that a large amount of glycosaminoglycan was secreted in the matrix after chondrogenic induction. Oil red O staining showed that lipid droplets could be seen in the cytoplasm of the cells induced by fat-forming. The results of real-time fluorescence PCR showed that the expression of related genes was significantly higher after 21 days of osteogenesis, cartilage formation and lipogenesis than at 7 days. Results the human amniotic mesenchymal stem cells had the potential of osteoblasts, chondrocytes and adipocytes, and could be used as seed cells for tissue engineering.
【作者單位】: 遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院骨科;
【基金】:貴州省科學(xué)技術(shù)基金資助項(xiàng)目(黔科合SY字[2010]3091)~~
【分類號(hào)】:R329.2
【正文快照】: 文章快速閱讀:定向誘導(dǎo)人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨、軟骨及脂肪細(xì)胞分化的過程原代人羊膜間充第人羊膜酶消化傳代培養(yǎng)3代人羊膜間質(zhì)干細(xì)胞充質(zhì)干細(xì)胞證實(shí)人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞可以向成骨、軟骨、脂肪細(xì)胞分化,成骨、軟骨、且21 d的分化效果及相關(guān)基因表達(dá)較7 d時(shí)更優(yōu)脂肪誘導(dǎo)文題
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