MicroRNA-382對人臍帶間充質干細胞生物學特性的影響
本文關鍵詞:MicroRNA-382對人臍帶間充質干細胞生物學特性的影響 出處:《中國實驗血液學雜志》2016年03期 論文類型:期刊論文
更多相關文章: 臍帶間充質干細胞 microRNA- 生物學特性
【摘要】:目的:探討microRNA-382(miR-382)對臍帶間充質干細胞(hUC-MSC)生物學特性的影響,以更深入的了解miRNA在MSC生物學特性中的調節(jié)機制。方法:對貼壁培養(yǎng)的hUC-MSC分別以miR-382 mimics及miR-382 inhibitor轉染,在倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)變化;使用CCK-8檢測miR-382轉染對hUC-MSC增殖的影響;分別使用油紅O和茜素紅染色檢測miR-382對hUC-MSC成脂及成骨分化的影響,并使用氯化十六烷基吡啶溶解茜素紅檢測其吸光度值以定量分析成骨情況,以RT-PCR檢測Runx2基因表達情況;使用RT-PCR方法檢測miR-382對hUCMSC分泌細胞因子基因表達的影響。結果:miR-382對hUC-MSC的形態(tài)無影響;miR-382不影響hUC-MSC的增殖;miR-382可以抑制hUC-MSC成骨分化而不影響其成脂分化;miR-382可以影響hUC-MSC細胞因子基因的表達,如IL-6,IDO1,G-CSF,M-CSF和GM-CSF的表達。結論:miR-382可以抑制hUC-MSC的成骨分化,并對其所分泌細胞因子的基因表達產生影響。
[Abstract]:Objective: to investigate the effect of microRNA-382 miR-382 on the biological characteristics of human umbilical cord mesenchymal stem cells (hUC-MSC). In order to better understand the regulatory mechanism of miRNA in the biological characteristics of MSC. Methods: miR-382 mimics and miR-382 were used for hUC-MSC in adherent culture. Inhibitor transfection. Cell morphology was observed under inverted microscope. CCK-8 was used to detect the effect of miR-382 transfection on the proliferation of hUC-MSC. Oil red O and alizarin red staining were used to detect the effects of miR-382 on hUC-MSC adipogenesis and osteogenic differentiation. The absorbance value of alizarin red was measured with hexadecylpyridine chloride to quantitatively analyze the osteogenesis and the expression of Runx2 gene was detected by RT-PCR. The effect of miR-382 on the gene expression of cytokines secreted by hUCMSC was detected by RT-PCR method. MiR-382 did not affect the proliferation of hUC-MSC. MiR-382 could inhibit the osteogenic differentiation of hUC-MSC without affecting its adipogenic differentiation. MiR-382 can affect the expression of cytokine gene in hUC-MSC, such as IL-6, IDO1G-CSF. Conclusion: miR-382 can inhibit the osteogenic differentiation of hUC-MSC and affect the gene expression of cytokines secreted by it.
【作者單位】: 中國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)學院血液學研究所血液病醫(yī)院實驗血液學國家重點實驗室;
【基金】:天津市應用基礎與前沿技術研究計劃(14JCZDJC33000) 國家科技支撐項目(2013BAIO1BO9)
【分類號】:R329.28
【正文快照】: J Exp Hematol 2016;24(3):852-857間充質干細胞(MSC)是一種具有高度自我增殖及多向分化能力的成體干細胞。由于其具有獨特的免疫調節(jié)及造血支持等能力,MSC在炎性疾病、自身免疫性疾病的治療及造血干細胞移植中得到廣泛的應用[1-3],而其生物學特性的調節(jié)機制成為目前研究的熱
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,本文編號:1388774
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