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一種易操作的小鼠肝細(xì)胞的分離及培養(yǎng)方法

發(fā)布時間:2018-01-04 00:11

  本文關(guān)鍵詞:一種易操作的小鼠肝細(xì)胞的分離及培養(yǎng)方法 出處:《中國比較醫(yī)學(xué)雜志》2017年11期  論文類型:期刊論文


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【摘要】:目的在傳統(tǒng)肝細(xì)胞提取方法的基礎(chǔ)上,優(yōu)化一種易操作、快速實用獲取小鼠肝細(xì)胞的方法,為從事肝臟功能相關(guān)研究人員提供改良的實驗方法參考。方法以肝臟分離液逆向灌注小鼠肝臟后,剪碎,肝臟酶消化后密度梯度離心分離肝細(xì)胞,轉(zhuǎn)入培養(yǎng)基培養(yǎng)。采用臺盼藍(lán)染色計算細(xì)胞活力,流式細(xì)胞檢測技術(shù)計算純度,倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)。結(jié)果獲得較高純度和活力的肝細(xì)胞,具備肝細(xì)胞的典型形態(tài)特征。結(jié)論通過逆向灌注,降低了灌注的難度,同時獲得較高純度、較高活力的肝細(xì)胞,經(jīng)多次實驗證明該方法確實是一種易操作、高效適用的肝細(xì)胞提取方法。
[Abstract]:Objective based on the traditional method of hepatocyte extraction, to optimize a rapid and practical method for obtaining mouse hepatocytes. Methods Hepatic cells were isolated from mouse liver by reverse perfusion with liver isolate, then shredded, digested by liver enzyme and centrifuged by density gradient centrifugation. The cell viability was calculated by trypan blue staining, the purity was calculated by flow cytometry, and the morphology was observed by inverted microscope. Conclusion by reverse perfusion, the difficulty of perfusion is reduced, and the liver cells with high purity and activity are obtained. The method is proved to be easy to operate by many experiments. An efficient and applicable method for hepatocyte extraction.
【作者單位】: 第三軍醫(yī)大學(xué)第一附屬醫(yī)院中心實驗室;
【基金】:國家自然科學(xué)基金項目(編號:81372089)
【分類號】:R-33
【正文快照】: 肝臟是人體最大的實質(zhì)器官和重要的排毒器官。在人體中擔(dān)負(fù)著去氧化、存儲肝糖、合成分泌性蛋白質(zhì)等重要作用。同時也是消化系統(tǒng)中重要的消化腺。它可以制造膽汁來幫助食物的消化,也是尿素合成的主要臟器,更是新陳代謝的重要器官[1]。因此,肝臟對于人體的重要作用不言而喻。肝

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2 趙聰,周耀霞;小鼠肝細(xì)胞細(xì)胞色素P4501A1/1A2誘導(dǎo)的免疫細(xì)胞化學(xué)研究[J];新消化病學(xué)雜志;1996年08期

3 王琳;徐建波;田元;吳河水;;一種分離新生小鼠肝細(xì)胞的簡單方法[J];中國優(yōu)生與遺傳雜志;2007年01期

4 印彤,童善慶,陸德源;超抗原SEB致小鼠肝細(xì)胞凋亡[J];中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志;1997年05期

5 王燕;周露婷;章衛(wèi)平;謝志芳;;高活力原代小鼠肝細(xì)胞的分離與純化[J];醫(yī)學(xué)研究雜志;2011年03期

6 王宇明;小鼠肝細(xì)胞分離培養(yǎng)中應(yīng)注意的問題[J];細(xì)胞生物學(xué)雜志;1992年03期

7 方定志,劉秉文;人及小鼠肝細(xì)胞膜載脂蛋白 CⅢ受體的研究[J];生物化學(xué)與生物物理進展;1993年03期

8 魏清柱,夏潮涌,黃中新,覃莉,饒曉黎,黃華梅;圖像分析系統(tǒng)在檢測生后發(fā)育期小鼠肝細(xì)胞核多倍體化中的應(yīng)用[J];解剖科學(xué)進展;2004年03期

9 解軍,徐鈞,于保鋒,胡曉年,程牛亮,牛勃;肝特異性非病毒基因治療載體介導(dǎo)增強型綠色熒光蛋白基因在小鼠肝細(xì)胞及肝臟中的表達(dá)[J];中華實驗外科雜志;2004年10期

10 趙粵萍;周云;張軍;劉廣超;馬遠(yuǎn)方;;膠原酶灌注法制備小鼠肝細(xì)胞[J];河南大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2008年03期

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4 曹曉哲;邢傳平;高自芳;錢震;董亮;;急性硒中毒后小鼠肝細(xì)胞線粒體損傷的時間形態(tài)學(xué)研究[A];第九屆中國體視學(xué)與圖像分析學(xué)術(shù)會議論文集[C];2001年

5 江河清;唐翠蘭;孫長宇;;氧化苦參堿對小鼠肝細(xì)胞凋亡相關(guān)基因bcl-2、bax表達(dá)的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會第七次全國感染病學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2001年

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3 蔡園;乙型肝炎病毒X蛋白對原代小鼠肝細(xì)胞周期的影響[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2012年



本文編號:1376194

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