半乳糖凝集素-3聯(lián)合HGF誘導(dǎo)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化為肝樣細(xì)胞
發(fā)布時(shí)間:2018-01-03 19:30
本文關(guān)鍵詞:半乳糖凝集素-3聯(lián)合HGF誘導(dǎo)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化為肝樣細(xì)胞 出處:《重慶醫(yī)學(xué)》2016年15期 論文類型:期刊論文
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【摘要】:目的探索半乳糖凝集素-3(Gal-3)聯(lián)合肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)誘導(dǎo)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)向肝樣細(xì)胞分化的可行性及最佳誘導(dǎo)條件,并對(duì)誘導(dǎo)后的細(xì)胞進(jìn)行鑒定。方法離心、貼壁培養(yǎng)分離大鼠BMSCs,流式細(xì)胞術(shù)鑒定表面標(biāo)志。取第3代細(xì)胞進(jìn)行分組誘導(dǎo)培養(yǎng),A組:0μg/mL Gal-3+20ng/mL肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF);B組:0.1μg/mL Gal-3+20ng/mL HGF;C組:0.5μg/mL Gal-3+20ng/mL HGF;D組:1.0μg/mL Gal-3+20ng/mL HGF;E組:2.0μg/mL Gal-3+20ng/mL HGF;陽(yáng)性對(duì)照組:SD大鼠肝臟細(xì)胞IAR20。分別于誘導(dǎo)后7、14、21、28d時(shí)段進(jìn)行細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察、免疫熒光染色檢測(cè)、實(shí)時(shí)熒光定量核酸擴(kuò)增檢測(cè)(Q-PCR)鑒定其誘導(dǎo)分化情況。結(jié)果分組誘導(dǎo)培養(yǎng)后,各組BMSCs形態(tài)逐漸向肝樣細(xì)胞轉(zhuǎn)化,與大鼠原代肝臟細(xì)胞IAR20相似,其中28d時(shí)間段,C組轉(zhuǎn)化成IAR20相似細(xì)胞比例最高;各組甲胎蛋白(AFP)、清蛋白(ALB)熒光染色陽(yáng)性率明顯增高,并且在28d時(shí)間點(diǎn)C組AFP、ALB的熒光染色陽(yáng)性率最高;C組AFP、ALB mRNA表達(dá)明顯增加,同時(shí)以28d時(shí)間點(diǎn)表達(dá)量達(dá)到峰值。結(jié)論 Gal-3聯(lián)合HGF能有效誘導(dǎo)大鼠BMSCs分化為肝樣細(xì)胞,分化后的肝樣細(xì)胞能分泌肝細(xì)胞特異性產(chǎn)物AFP、ALB,且其誘導(dǎo)效率與誘導(dǎo)培養(yǎng)時(shí)間和Gal-3濃度有關(guān)。
[Abstract]:Objective To investigate the feasibility and optimal induction conditions of rat bone marrow mesenchymal stem cells ( BMSC ) induced by galactosyl - 3 ( Gal - 3 ) combined with hepatocyte growth factor ( HGF ) in rat bone marrow mesenchymal stem cells ( MSCs ) . The results were as follows : 鈶,
本文編號(hào):1375288
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