本文關(guān)鍵詞：銅綠假單胞菌上清液誘導(dǎo)J774細胞凋亡過程中凋亡誘導(dǎo)因子的表達　出處：《遼寧醫(yī)學院》2011年碩士論文　論文類型：學位論文

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【摘要】：目的 探討凋亡誘導(dǎo)因子在銅綠假單胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)上清液誘導(dǎo)J774細胞凋亡中的表達。 方法 1、將J774與濃度為15%PA上清液在37℃的水浴箱中分別培養(yǎng)3h、6h和9h。 2、以Giemsa、Hoechst33258熒光等染色及Annexin V FITC/PI雙染流式細胞儀檢測為指標,觀察細胞形態(tài)學變化,研究PA上清液對J774細胞凋亡的誘導(dǎo)作用。 3、用Western印跡分析檢測AIF蛋白在PA上清液誘導(dǎo)J774細胞凋亡中的表達水平。 4、用瓊脂凝膠(1.8%)電泳法測到特征性的150-1500bp的DNA降解片段。 結(jié)果 Giemsa染色和Hoechst33258熒光染色顯微鏡下觀察:隨時間延長,凋亡細胞數(shù)量逐漸增多,3h組細胞膜完整的,但出現(xiàn)發(fā)泡現(xiàn)象;6、9h組細胞皺縮,核密度增高,核斷裂,可見凋亡小體,對照組細胞則正常生長。Annexin V FITC/PI雙染流式細胞儀檢測,表明PA上清液可誘導(dǎo)J774細胞迅速發(fā)生凋亡,且凋亡率隨時間延長明顯升高,組間比較均有統(tǒng)計學差異(P均0.01)。各實驗組間比較差異均有統(tǒng)計學意義(P0.01)。Western blot結(jié)果顯示,3h組AIF開始出現(xiàn)低量表達,6、9h組AIF表達更加明顯,與對照組比較均有統(tǒng)計學差異(P均0.01)。用瓊脂凝膠(1.8%)電泳法測到特征性的150-1500bp的DNA降解片段。 結(jié)論 1、PA上清液可以誘導(dǎo)J774細胞凋亡。 2、PA上清液PA所致的J774細胞的凋亡具有時間依賴性。 3、PA上清液誘導(dǎo)J774細胞凋亡與AIF表達有關(guān)。
[Abstract]:Purpose To investigate the expression of apoptosis-inducing factor in the supernatant of Pseudomonas aeruginosa PA) induced apoptosis in J774 cells. Method 1. The supernatants of J774 and 15kPA were cultured in a water bath at 37 鈩，

本文編號：1371687